24小时热门版块排行榜    

查看: 825  |  回复: 7
当前主题已经存档。

815kathy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒老提不出来

最近在提质粒,死活也提不出来,每次电泳完紫外下照除了RNA什么也没有,要是加入溶液二剧烈了的话也该有基因组啊,基因组也没有。现在主要有以下几个问题:
1.加入溶液二有时候不变澄清,是怎么回事,与细菌的革兰氏阴阳性有无关系呢?
2.溶液三加入后,出现了沉淀,吸取一点点上清,测PH为酸性,并不是传说中的中性啊,这是怎么回事呢?
3.加入溶液三后大概要冰浴多长时间呢?有说5min的,有说10min的,还有说15min的。。。
希望各位大虾指点迷津。。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们做的时候冰浴5min钟,你确保试剂比例合适?如果是就不应该呀!细菌的革兰氏阴阳性可能有关,因为阳性细胞壁太厚,可能破壁不充分吧。
倚楼听风雨,淡看江湖路!
2楼2010-03-11 23:11:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

steven689

木虫 (著名写手)

阳性的话 加溶菌酶
3楼2010-03-12 08:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

815kathy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冬虫夏草1 at 2010-03-11 23:11:54:
我们做的时候冰浴5min钟,你确保试剂比例合适?如果是就不应该呀!细菌的革兰氏阴阳性可能有关,因为阳性细胞壁太厚,可能破壁不充分吧。

恩,试剂比例是100,200,150啊,请问试剂三你是怎么配的啊,按照醋酸钠60ml,冰乙酸11.5ml,水28.5ml,配出来的溶液PH值是5.5左右,可是有的地方又说是4.8,要是再往里面加冰乙酸调的话不就使得溶液体积增大了吗
4楼2010-03-12 08:43:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

增加菌量试试
5楼2010-03-12 09:35:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1 溶液2不变澄清可能是细菌菌量多了,不能完全破壁;也可能是革兰氏阳性菌,没加溶菌酶,压根就没破壁
2 没配过
3 也可以不放置的
如果没出来,是不是你的菌本身质粒就低,可考虑最后浓缩后电泳
修炼ing,当虫仙……
6楼2010-03-12 16:25:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

livacin

铁虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个情况我也遇到过 同样的试剂 但是就是被处理的菌液不同 有的就可以被2液消化 有的就不行 始终保持浑浊 无粘性 我觉得跟菌液有关系
7楼2010-03-12 22:15:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lansha8331

无虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也没准是盒子的问题呢,换一家试试,我用的威格拉斯的去内毒素大提,可以参考一下
8楼2010-03-18 10:32:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 815kathy 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +6 羊腰板 2026-08-21 6/300 2026-08-21 21:03 by 雪城001
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 12/600 2026-08-21 19:46 by kulium
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见