应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒老提不出来
81/1返回列表
查看: 899  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

815kathy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒老提不出来

最近在提质粒，死活也提不出来，每次电泳完紫外下照除了RNA什么也没有，要是加入溶液二剧烈了的话也该有基因组啊，基因组也没有。现在主要有以下几个问题：
1.加入溶液二有时候不变澄清，是怎么回事，与细菌的革兰氏阴阳性有无关系呢？
2.溶液三加入后，出现了沉淀，吸取一点点上清，测PH为酸性，并不是传说中的中性啊，这是怎么回事呢？
3.加入溶液三后大概要冰浴多长时间呢？有说5min的，有说10min的，还有说15min的。。。
希望各位大虾指点迷津。。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-03-11 23:01:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们做的时候冰浴5min钟，你确保试剂比例合适？如果是就不应该呀！细菌的革兰氏阴阳性可能有关，因为阳性细胞壁太厚，可能破壁不充分吧。
赞一下(1人) 回复此楼
倚楼听风雨，淡看江湖路！
2楼2010-03-11 23:11:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

steven689

木虫 (著名写手)
阳性的话 加溶菌酶
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-12 08:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

815kathy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冬虫夏草1 at 2010-03-11 23:11:54:
我们做的时候冰浴5min钟，你确保试剂比例合适？如果是就不应该呀！细菌的革兰氏阴阳性可能有关，因为阳性细胞壁太厚，可能破壁不充分吧。

恩，试剂比例是100，200，150啊，请问试剂三你是怎么配的啊，按照醋酸钠60ml，冰乙酸11.5ml，水28.5ml，配出来的溶液PH值是5.5左右，可是有的地方又说是4.8，要是再往里面加冰乙酸调的话不就使得溶液体积增大了吗
赞一下 回复此楼
4楼2010-03-12 08:43:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)
增加菌量试试
回复此楼
5楼2010-03-12 09:35:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1 溶液2不变澄清可能是细菌菌量多了，不能完全破壁；也可能是革兰氏阳性菌，没加溶菌酶，压根就没破壁
2 没配过
3 也可以不放置的
如果没出来，是不是你的菌本身质粒就低，可考虑最后浓缩后电泳
赞一下(1人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
6楼2010-03-12 16:25:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

livacin

铁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个情况我也遇到过 同样的试剂 但是就是被处理的菌液不同 有的就可以被2液消化 有的就不行 始终保持浑浊 无粘性 我觉得跟菌液有关系
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-03-12 22:15:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lansha8331

无虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也没准是盒子的问题呢，换一家试试，我用的威格拉斯的去内毒素大提，可以参考一下
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-03-18 10:32:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 815kathy 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-11 04:21 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 04:07 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 5/250 2026-11-11 04:01 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 03:59 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 03:56 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:32 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 01:26 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-11 01:24 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:13 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:10 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 21:02 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:12 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭