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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DNA胶回收效率很低怎么办
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suntaofendou

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】DNA胶回收效率很低怎么办

切胶纯化的DNA量总是很少，电泳时基本没东西，请问诸位大侠回收中哪里出问题了啊？我老是找不出来呀
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1楼 2010-03-04 21:46:04
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ideal9268

铜虫 (小有名气)
★
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我也是，同时回收两块同样亮度的胶，之后电泳差别很大，真是奇怪！
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2楼2010-03-04 22:01:17
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gandalf886

银虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1):是个办法 2010-03-06 20:54
换个好点的试剂盒
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3楼2010-03-05 13:59:46
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randomqd

木虫 (小有名气)

樱花骑士

大小如何

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小片段不好加回收。。。和大片段不一样
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未来天空才是极限
4楼2010-03-05 14:35:46
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mourning

木虫 (正式写手)
多准备点样品一起回收到一管里看看
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5楼2010-03-05 14:55:35
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hfztim

至尊木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2): 2010-03-05 19:34
1.提高回收率的话，一定要注意滤膜上的DNA要充分溶解（40度，20分钟），再离心。
2.若要提高回收量的话，可以加大上样量/浓度再切胶回收（用宽厚的梳子或切几块到一个管子中）。
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6楼2010-03-05 15:48:31
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yang0071

木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-03-05 19:34
小片段要加入1/3预热异丙醇，充分混匀后，继续进行下一步操作
最后溶解时 加入液体要居中加，可以37度放置1-3min再离心
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7楼2010-03-05 17:03:35
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diaoyuhua

金虫 (小有名气)
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-03-05 19:34
要严格按试剂盒上的药品用量加入，不要随意改动，应该不会有问题的
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8楼2010-03-05 17:17:58
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-03-05 19:34
点样时加大量，回收后上柱溶解2-3次，可提高回收效率
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9楼2010-03-05 17:27:14
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Charlie1331

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-03-05 19:34
如果回收率低的话，在后续操作步骤时，可以加大效率低的回收产物的量。胶回收的效率是不太高滴。
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10楼2010-03-05 19:14:41
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