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【求助】多糖抗氧化问题
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| 我现在做多糖的抗氧化实验，但是多糖对羟基自由基的清除作用一直做不出来，清除率呈现负值，文献中查到的方法大部分都尝试过，总是不行，向高手请教！ |
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2楼2010-01-14 10:43:50
zzhshan911
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3楼2010-01-14 10:46:09
4楼2010-01-14 14:06:57
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羟自由基清除活性 空白管：1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水 对照管：1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL PBS 样品管：1 mL样品+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水 加完后摇匀在37˚C水浴反应30min，520nm测定吸光度。 其中PBS缓冲液（150mM,pH=7.4）,番红花(360µg/mL）,H2O2（3%）, EDTA-Fe(2mM)。 EDTA-Fe和样品需要水溶，其余用PBS溶解。 清除率=A样品/A对照 我也用过你说的这个方法，但为什么会出现沉淀呢 |
5楼2010-01-14 19:42:23
zzhshan911
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6楼2010-01-15 09:49:50
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反应体系中加入pH值为7.4的磷酸缓冲液1.0 mL，番红(520 μg/mL) 0.2 mL，EDTANa2-Fe(II) 1.0 mL，再加入不同浓度的样品溶液1.0 mL，最后加入6% 的H2O2 0.8 mL，混匀后于40 ℃水浴保温30 min，在波长514.9 nm处测吸光度A值。每个多糖浓度作三个平行样，取其平均值。空白组以等体积的重蒸水代替样品溶液；对照组以等体积的重蒸水代替样品溶液和EDTANa2-Fe(II)溶液。实验结果以清除率E%表示：E%=( A样品- A空白)×100/(A对照- A空白) 我用的是这个方法，方法中用到的溶液都是用水溶解的，也是按照这个顺序加的溶液，结果就出现沉淀了 |
7楼2010-01-15 11:49:22
zzhshan911
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