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【求助】多糖抗氧化问题
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| 我现在做多糖的抗氧化实验,但是多糖对羟基自由基的清除作用一直做不出来,清除率呈现负值,文献中查到的方法大部分都尝试过,总是不行,向高手请教! |
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zzhshan911
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2楼2010-01-14 10:43:50
zzhshan911
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3楼2010-01-14 10:46:09

4楼2010-01-14 14:06:57
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羟自由基清除活性 空白管:1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水 对照管:1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL PBS 样品管:1 mL样品+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水 加完后摇匀在37˚C水浴反应30min,520nm测定吸光度。 其中PBS缓冲液(150mM,pH=7.4),番红花(360µg/mL),H2O2(3%), EDTA-Fe(2mM)。 EDTA-Fe和样品需要水溶,其余用PBS溶解。 清除率=A样品/A对照 我也用过你说的这个方法,但为什么会出现沉淀呢 |

5楼2010-01-14 19:42:23
zzhshan911
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6楼2010-01-15 09:49:50
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反应体系中加入pH值为7.4的磷酸缓冲液1.0 mL,番红(520 μg/mL) 0.2 mL,EDTANa2-Fe(II) 1.0 mL,再加入不同浓度的样品溶液1.0 mL,最后加入6% 的H2O2 0.8 mL,混匀后于40 ℃水浴保温30 min,在波长514.9 nm处测吸光度A值。每个多糖浓度作三个平行样,取其平均值。空白组以等体积的重蒸水代替样品溶液;对照组以等体积的重蒸水代替样品溶液和EDTANa2-Fe(II)溶液。实验结果以清除率E%表示:E%=( A样品- A空白)×100/(A对照- A空白) 我用的是这个方法,方法中用到的溶液都是用水溶解的,也是按照这个顺序加的溶液,结果就出现沉淀了 |

7楼2010-01-15 11:49:22
zzhshan911
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10楼2010-01-20 12:49:18












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