应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】多糖抗氧化问题
101/1返回列表
查看: 1177  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

Violet紫罗兰

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】多糖抗氧化问题

我现在做多糖的抗氧化实验，但是多糖对羟基自由基的清除作用一直做不出来，清除率呈现负值，文献中查到的方法大部分都尝试过，总是不行，向高手请教！
回复此楼

» 猜你喜欢
我喜欢一切顺其自然！
1楼 2010-01-13 20:38:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhshan911

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本人就是做的多糖的抗氧化活性，有关信息在以往的帖子上发过，你搜索一下看看有关帖子及回复。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-01-14 10:43:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhshan911

铁杆木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢发言！ 1-14 13:42
羟自由基活性实验需要有空白管及对照管，实验时一定要注意空白管必须变无色，而对照管颜色比试样管颜色要深。不知道你的方法是不是跟我的一样，我的方法以前回复别人的帖子写过，你查查吧
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2010-01-14 10:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Violet紫罗兰

银虫 (初入文坛)

多糖抗氧化问题

引用回帖:
Originally posted by zzhshan911 at 2010-1-14 10:46:
羟自由基活性实验需要有空白管及对照管，实验时一定要注意空白管必须变无色，而对照管颜色比试样管颜色要深。不知道你的方法是不是跟我的一样，我的方法以前回复别人的帖子写过，你查查吧

非常感谢！
回复此楼
我喜欢一切顺其自然！
4楼2010-01-14 14:06:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Violet紫罗兰

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zzhshan911 at 2010-1-14 10:46:
羟自由基活性实验需要有空白管及对照管，实验时一定要注意空白管必须变无色，而对照管颜色比试样管颜色要深。不知道你的方法是不是跟我的一样，我的方法以前回复别人的帖子写过，你查查吧

羟自由基清除活性
空白管：1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水
对照管：1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL PBS
样品管：1 mL样品+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水
加完后摇匀在37˚C水浴反应30min，520nm测定吸光度。
其中PBS缓冲液（150mM,pH=7.4）,番红花(360µg/mL）,H2O2（3%）, EDTA-Fe(2mM)。
EDTA-Fe和样品需要水溶，其余用PBS溶解。
  清除率=A样品/A对照


我也用过你说的这个方法，但为什么会出现沉淀呢
赞一下 回复此楼
我喜欢一切顺其自然！
5楼2010-01-14 19:42:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhshan911

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 1-15 12:31
你要注意多糖在磷酸缓冲液中会沉淀的，一定要用水溶解。EDTA-Fe也是水溶解。我按照这个方法做的，就没再出现沉淀的。不知道你的沉淀是在哪个步骤出现的，加入哪种试剂后出现的？
赞一下(11人) 回复此楼
6楼2010-01-15 09:49:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Violet紫罗兰

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zzhshan911 at 2010-1-15 09:49:
你要注意多糖在磷酸缓冲液中会沉淀的，一定要用水溶解。EDTA-Fe也是水溶解。我按照这个方法做的，就没再出现沉淀的。不知道你的沉淀是在哪个步骤出现的，加入哪种试剂后出现的？

反应体系中加入pH值为7.4的磷酸缓冲液1.0 mL，番红(520 μg/mL) 0.2 mL，EDTANa2-Fe(II) 1.0 mL，再加入不同浓度的样品溶液1.0 mL，最后加入6% 的H2O2 0.8 mL，混匀后于40 ℃水浴保温30 min，在波长514.9 nm处测吸光度A值。每个多糖浓度作三个平行样，取其平均值。空白组以等体积的重蒸水代替样品溶液；对照组以等体积的重蒸水代替样品溶液和EDTANa2-Fe(II)溶液。实验结果以清除率E%表示：E%=( A样品- A空白)×100/(A对照- A空白)

我用的是这个方法，方法中用到的溶液都是用水溶解的，也是按照这个顺序加的溶液，结果就出现沉淀了
赞一下 回复此楼
我喜欢一切顺其自然！
7楼2010-01-15 11:49:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhshan911

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是顺序一定按照：1 mL样品+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水，呵呵，我也不清楚了。不要一切都水溶，改用PBS溶的就溶它溶，或许这是沉淀原因
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-01-15 15:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hezhao999

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们做的时候在测吸光度之前用0.45um膜过滤一遍
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-01-15 16:11:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Violet紫罗兰

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zzhshan911 at 2010-1-14 10:46:
羟自由基活性实验需要有空白管及对照管，实验时一定要注意空白管必须变无色，而对照管颜色比试样管颜色要深。不知道你的方法是不是跟我的一样，我的方法以前回复别人的帖子写过，你查查吧

请问你做的时候空白管的颜色完全是无色的吗？还是微微的有一点颜色啊？我做的时候空白管还会有点颜色，不能完全变成无色，你是怎么使空白管变成无色的呢？
赞一下 回复此楼
我喜欢一切顺其自然！
10楼2010-01-20 12:49:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Violet紫罗兰 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭