应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因组DNA用Mse I酶切后，琼脂糖电泳为什么没有跑出弥散区？
71/1返回列表
查看: 558  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

sunnyci

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】基因组DNA用Mse I酶切后，琼脂糖电泳为什么没有跑出弥散区？

最近将基因组DNA用MseI来酶切，体系为20微升：genomic DNA（100ng/uL)  5uL,10*Buffer 2uL,Mse I 0.5 uL)，酶切65度3小时，但是用1%琼脂糖电泳，什么都没有跑出来，但是后续工作中，连接完Mse I接头 再用PCR后，就有了弥散区，大概在100-1000之间，请问这正常吗？酶切产物跑不出东西是什么原因，谢谢大家了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-01-08 11:03:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyls6868

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先替你顶一下吧呵呵，我也出现过这种问题，我以为是DNA浓度太小了，是不是检测除问题了呢？
可以在检测酶切产物的时候旁边点一个DNA做对照，看是不是DNA的原因
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-01-08 11:07:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
酶切温度65度是不是太高了啊，我怎么记得65度都能灭活了，不过你检测的什么也没看到是正常的，DNA被酶切后就是什么都看不到的，除非DNA量比较大
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-01-08 12:05:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyls6868

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-8 12:05:
酶切温度65度是不是太高了啊，我怎么记得65度都能灭活了，不过你检测的什么也没看到是正常的，DNA被酶切后就是什么都看不到的，除非DNA量比较大

是有65°酶的，呵呵在这个温度下，活性最大。但是酶切后什么都看不到没有道理吧呵呵
赞一下 回复此楼
4楼2010-01-08 12:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-1-8 12:09:

是有65°酶的，呵呵在这个温度下，活性最大。但是酶切后什么都看不到没有道理吧呵呵

酶切后基因组成弥散状态，但是由于量小，均匀分布，就看不到了，非常正常，我们一般检测，就认为看不到就是好的，看了往下做就要稀释
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-01-08 12:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyls6868

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最好还是要检测到吧呵呵，量太小的话，后面的pcr是不是也受影响呢？
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-01-08 15:14:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
你的酶很奇特。。。
回复此楼
7楼2010-01-09 09:26:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunnyci 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 有没有学校材料专业收跨调(一志愿085410) +6 momo(上岸版) 2026-04-06 9/450 2026-04-11 22:38 by wj165256
[考研] 271求调剂 +21 2261744733 2026-04-11 21/1050 2026-04-11 20:19 by Angchemist
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 352 求调剂 +6 yzion 2026-04-11 8/400 2026-04-11 16:24 by 明月此时有
[考研] 308求调剂 +3 VvvvL 2026-04-10 3/150 2026-04-11 15:32 by xiangxu
[考研] 269电子信息求调剂，可转专业 +11 独酌wl 2026-04-06 11/550 2026-04-11 11:12 by 逆水乘风
[考研] 一志愿211，化学310分，本科重点双非，求调剂 +23 努力奋斗112 2026-04-08 23/1150 2026-04-10 23:29 by 314126402
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 285求调剂 +9 AZMK 2026-04-07 11/550 2026-04-10 15:24 by AZMK
[考研] 调剂 +24 不逢春 2026-04-07 25/1250 2026-04-10 09:39 by 690616278
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
[考研] 0703化学调剂 348分 +14 唉我超真没招了 2026-04-06 15/750 2026-04-08 19:16 by 我减肥1
[考研] 0854电子信息319求调剂（接受跨专业调剂） +5 星星不眨眼喽 2026-04-05 6/300 2026-04-07 22:16 by hemengdong
[考研] 305求调剂 +4 77Qi 2026-04-06 4/200 2026-04-07 20:06 by shanqishi
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
[考研] 生物调剂 +5 橙子橙子橙子啊 2026-04-05 9/450 2026-04-07 15:31 by 上岸快快
[考研] 304求调剂 +4 luoye0105 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:05 by 木子君1218
[考研] 求调剂到0856材料工程 +3 程9915 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:15 by 蓝云思雨
[考研] 工科277分求调剂材料 +8 上了上了上哦 2026-04-05 9/450 2026-04-05 13:05 by wwytracy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭