应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因组DNA用Mse I酶切后，琼脂糖电泳为什么没有跑出弥散区？
71/1返回列表
查看: 557  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

sunnyci

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】基因组DNA用Mse I酶切后，琼脂糖电泳为什么没有跑出弥散区？

最近将基因组DNA用MseI来酶切，体系为20微升：genomic DNA（100ng/uL)  5uL,10*Buffer 2uL,Mse I 0.5 uL)，酶切65度3小时，但是用1%琼脂糖电泳，什么都没有跑出来，但是后续工作中，连接完Mse I接头 再用PCR后，就有了弥散区，大概在100-1000之间，请问这正常吗？酶切产物跑不出东西是什么原因，谢谢大家了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-01-08 11:03:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyls6868

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先替你顶一下吧呵呵，我也出现过这种问题，我以为是DNA浓度太小了，是不是检测除问题了呢？
可以在检测酶切产物的时候旁边点一个DNA做对照，看是不是DNA的原因
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-01-08 11:07:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
酶切温度65度是不是太高了啊，我怎么记得65度都能灭活了，不过你检测的什么也没看到是正常的，DNA被酶切后就是什么都看不到的，除非DNA量比较大
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-01-08 12:05:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyls6868

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-8 12:05:
酶切温度65度是不是太高了啊，我怎么记得65度都能灭活了，不过你检测的什么也没看到是正常的，DNA被酶切后就是什么都看不到的，除非DNA量比较大

是有65°酶的，呵呵在这个温度下，活性最大。但是酶切后什么都看不到没有道理吧呵呵
赞一下 回复此楼
4楼2010-01-08 12:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-1-8 12:09:

是有65°酶的，呵呵在这个温度下，活性最大。但是酶切后什么都看不到没有道理吧呵呵

酶切后基因组成弥散状态，但是由于量小，均匀分布，就看不到了，非常正常，我们一般检测，就认为看不到就是好的，看了往下做就要稀释
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-01-08 12:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyls6868

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最好还是要检测到吧呵呵，量太小的话，后面的pcr是不是也受影响呢？
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-01-08 15:14:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
你的酶很奇特。。。
回复此楼
7楼2010-01-09 09:26:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunnyci 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +5 柯淮然 2026-04-12 6/300 2026-04-12 01:13 by 柯淮然
[考研] 291求调剂 +10 关忆北. 2026-04-09 11/550 2026-04-12 00:45 by xuxiang
[考研] 计算机22408 281分，求调剂 +7 17715607211 2026-04-06 7/350 2026-04-12 00:43 by xuxiang
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-11 7/350 2026-04-11 23:48 by baobaoye
[考研] 求调剂，一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 274求调剂求调剂 +11 Jachenbingoo 2026-04-06 14/700 2026-04-11 11:37 by 紫曦紫棋
[考研] 一志愿085502，267分求调剂 +11 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 12/600 2026-04-11 11:08 by zhq0425
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385，求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 22408 366分，本科211，一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[硕博家园] 0856材料化工求调剂，一志愿211，初试成绩349 +5 江淮北月 2026-04-05 5/250 2026-04-10 16:26 by 高维春
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +8 求上岸的小王 2026-04-10 8/400 2026-04-10 15:09 by hemengdong
[考研] 301求调剂 +6 静静想想 2026-04-05 6/300 2026-04-10 09:15 by Delta2012
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9，326分 +7 刘墨墨 2026-04-06 7/350 2026-04-10 08:11 by kangsm
[考研] 一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂 +16 路痴小琪 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:08 by kangsm
[考研] 085400电子信息类（川大控制工程）求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 085404，334分，求调剂 +5 sunjie8888 2026-04-08 8/400 2026-04-09 07:26 by sunjie8888
[考研] 生物学学硕，初试351分，求调剂 +4 …～、王…～ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
[考研] 388求调剂 +6 四川王涛 2026-04-07 8/400 2026-04-08 00:17 by JourneyLucky
[考研] 生物调剂 +5 橙子橙子橙子啊 2026-04-05 9/450 2026-04-07 15:31 by 上岸快快
[考研] 325 调剂 +6 QQ小虾 2026-04-07 6/300 2026-04-07 15:17 by Ccclqqq
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭