24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 559  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sunnyci

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】基因组DNA用Mse I酶切后,琼脂糖电泳为什么没有跑出弥散区?

最近将基因组DNA用MseI来酶切,体系为20微升:genomic DNA(100ng/uL)  5uL,10*Buffer 2uL,Mse I 0.5 uL),酶切65度3小时,但是用1%琼脂糖电泳,什么都没有跑出来,但是后续工作中,连接完Mse I接头 再用PCR后,就有了弥散区,大概在100-1000之间,请问这正常吗?酶切产物跑不出东西是什么原因,谢谢大家了
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切温度65度是不是太高了啊,我怎么记得65度都能灭活了,不过你检测的什么也没看到是正常的,DNA被酶切后就是什么都看不到的,除非DNA量比较大
3楼2010-01-08 12:05:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

xyls6868

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先替你顶一下吧呵呵,我也出现过这种问题,我以为是DNA浓度太小了,是不是检测除问题了呢?
可以在检测酶切产物的时候旁边点一个DNA做对照,看是不是DNA的原因
2楼2010-01-08 11:07:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyls6868

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-8 12:05:
酶切温度65度是不是太高了啊,我怎么记得65度都能灭活了,不过你检测的什么也没看到是正常的,DNA被酶切后就是什么都看不到的,除非DNA量比较大

是有65°酶的,呵呵在这个温度下,活性最大。但是酶切后什么都看不到没有道理吧呵呵
4楼2010-01-08 12:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-1-8 12:09:

是有65°酶的,呵呵在这个温度下,活性最大。但是酶切后什么都看不到没有道理吧呵呵

酶切后基因组成弥散状态,但是由于量小,均匀分布,就看不到了,非常正常,我们一般检测,就认为看不到就是好的,看了往下做就要稀释
5楼2010-01-08 12:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408 312求调剂 +8 门路摸摸 2026-04-14 8/400 2026-04-14 09:06 by lbsjt
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +10 路六六jjj 2026-04-13 10/500 2026-04-14 07:08 by babysonlkd
[考研] 调剂 +11 月@163.com 2026-04-11 11/550 2026-04-13 22:52 by pies112
[考研] 314求调剂 +24 wakeluofu 2026-04-09 25/1250 2026-04-13 08:58 by lhj2009
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成!
[考研] 求调剂,一志愿材料科学与工程985,365分, +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 085400 328分 求调剂 +10 喂你一个大橙子 2026-04-09 14/700 2026-04-11 19:53 by lqspecial
[考研] 求调剂 +3 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 14:13 by luhong1990
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 化学工程与技术324调剂 +23 孙常华 2026-04-09 25/1250 2026-04-11 00:07 by 骑牛渡寒江
[考研] 一志愿211,化学310分,本科重点双非,求调剂 +23 努力奋斗112 2026-04-08 23/1150 2026-04-10 23:29 by 314126402
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 材料专业344求调剂 +16 hualkop 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 17:28 by laoshidan
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-08 3/150 2026-04-08 22:00 by zhouyuwinner
[考研] 生物学328分求调剂 +9 闪电kkl 2026-04-08 10/500 2026-04-08 21:42 by liuhuiying09
信息提示
请填处理意见