应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于MTT法吸光度值偏小
53/1返回列表
查看: 4627  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

1121prettycat

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于MTT法吸光度值偏小 已有4人参与

目前正在用MTT法测定细胞存活率，步骤是将培养液吸出后，加入200微升MTT，37°孵育3到4个小时，然后加入150微升DMSO，想问一下大家用的检测波长和参考波长都是多少，我目前用的是490nm的检测波长和650nm的测定波长，现在用490nm得到的吸光度值包括对照都不到0.2，大约在0.17左右，650nm检测得到的数据大约都在0.05或者0.06，不知道吸光度值偏小是因为孵育时间不够还是与细胞有关，因为使用别的细胞的时候吸光度值都没有这么小，想问一下吸光度这么小数据能否使用？
还有数据处理的时候是不是应该用各孔在490nm检测时得到的数值-650nm检测时得到的数值？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-01-08 09:20:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwlck

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1楼: Originally posted by 1121prettycat at 2010-01-08 09:20:03
目前正在用MTT法测定细胞存活率，步骤是将培养液吸出后，加入200微升MTT，37°孵育3到4个小时，然后加入150微升DMSO，想问一下大家用的检测波长和参考波长都是多少，我目前用的是490nm的检测波长和650nm的测定波长， ...

我最近也在做MTT，遇到了同样的问题。你用的ab法是什么法？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
22楼2017-11-08 22:40:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
1121prettycat(金币+1):谢谢参与
1121prettycat(金币+1,VIP+0): 1-8 14:09
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-8 18:04
用的细胞数量太少，或者你的细胞特殊，不适合MTT染色。
赞一下(15人) 回复此楼
2楼2010-01-08 11:28:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaozx123

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
1121prettycat(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3,VIP+0): 1-8 17:28
请问你用的MTT是多大浓度的？怎么加200ul啊。
我用的MTT是2mg/ml的，每孔加50ul，（有的用5mg/ml，每孔加20ul），孵育3h后，加150ulDMSO溶解，用490nm和630nm测吸光值，也就是你说的检测波长与参照波长。
吸光值最好在0.2-0.8范围内，因为这个是最准确的。你测得值小，可能与接种的细胞量有关，还有就是MTT的用量。
数据处理时是需要相减的，即A490-A630。
赞一下(21人) 回复此楼
3楼2010-01-08 11:30:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1121prettycat

木虫 (正式写手)
加的5mg/L的MTT，每孔200微升，用的是原代培养的大鼠小脑颗粒神经元，接种密度7.5万，在培养1d后加药，加药1d和7d后测定
赞一下 回复此楼
4楼2010-01-08 14:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭