应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR扩增问题：非特异条带！
52/1返回列表
查看: 1551  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yxx41

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR扩增问题：非特异条带！ 已有6人参与

用报道的引物进行PCR，但是出现了很多非特异性条带：
泳道          模板              退火温度
1             cDNA              60
2             cDNA              58
3             cDNA              54
4             菌1总DNA       60
5             同上                 58
6            marker DL 2000
7             菌1总DNA       54
8             菌2总DNA       60
9                   同上           58
10                 同上           54

原因是何？如何解决？
回复此楼

» 猜你喜欢
内事不决问百度，外事不决问Google，横批：wikipedia
1楼 2009-12-31 16:52:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tz1301060311

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-14 00:13
我的PCR体系是50ul的，退火温度是47度。跑出来，有过杂带，大概在1000-1500左右，导师说是质粒，在查询后明确做的菌中含有质粒
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2010-04-13 15:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

qingfengwu

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+3,VIP+0):谢谢交流 12-31 17:10
yxx41(金币+3,VIP+0): 1-1 10:02
1 使用特异性高的PCR溶液进行，比如hot-start溶液，而不是用普通的taq
   这样比较容易扩增到特异性高的。takara公司有很多特异性很好的hot-start 酶。
2 把PCR protocol换成touch down等方式，不用一般的程序。
赞一下(12人) 回复此楼
2楼2009-12-31 17:07:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

85715623

木虫 (正式写手)
★
yxx41(金币+1,VIP+0): 1-1 10:02
应该考虑一下DNA提的怎么样啊？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-12-31 17:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoliang38

铁虫 (小有名气)
★
yxx41(金币+1,VIP+0): 1-1 10:02
我们只能说出所有问题的中的几个，你降低下引物的浓度吧 另外楼主你的目的条带是哪个？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-12-31 18:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 14:05 by GkCVyODlx4mR
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 11:52 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:39 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 06:22 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 02:09 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭