24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1000  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

qing1985

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于DNA测序问题

有哪位大虾可以帮下忙,帮小弟解决些问题:
       我将样品用切胶的方法来纯化,用OMEGA的试剂盒来回收,但送去测序的时候老是出现信号衰减,请问是什么原因啊?

[ Last edited by amisking on 2009-12-26 at 13:00 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioxixi

木虫 (著名写手)


1949stone(金币+1,VIP+0): 12-26 19:20
PCR产物直接测序?
建议做TA克隆,鉴定后测序
3楼2009-12-26 13:39:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

09021122

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5,VIP+0): 12-26 13:01
一:纯化后有没有检测,看看条带的亮度如何.
二:DNA片段的长度是多少?如果很长的话,可能测不通。
三:测序引物是否有问题。
四:建议最好做克隆,因为可能后的测序效果很好,而且较准确。
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
2楼2009-12-26 12:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

genomelin

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢交流 12-26 19:21
qing1985(金币+5,VIP+0): 1-7 15:01
可能是你的模板前段有复杂的二级结构,送去测序的时候让公司多加点ET或者直接用BigDye做测序反应,也有可能是测序反应的时候引物量少了,反应后的小片段过多,也会有衰减的现象
4楼2009-12-26 13:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qing1985

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 09021122 at 2009-12-26 12:58:
一:纯化后有没有检测,看看条带的亮度如何.
二:DNA片段的长度是多少?如果很长的话,可能测不通。
三:测序引物是否有问题。
四:建议最好做克隆,因为可能后的测序效果很好,而且较准确。

纯化后检测都是可以达到10ng/ul的,片段大小是700bp左右,测序的时候到300多就开始衰减了,有可能是我的纯化过程中的东西残留影响测序吗?
5楼2009-12-26 19:19:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 有没有学校材料专业收跨调(一志愿085410) +6 momo(上岸版) 2026-04-06 9/450 2026-04-11 22:38 by wj165256
[考研] 求调剂 +6 小聂爱学习 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:20 by 蓝云思雨
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +18 ioodiiij 2026-04-08 18/900 2026-04-11 20:25 by liyun12321
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 化学308分求调剂 +22 你好明天你好 2026-04-07 24/1200 2026-04-11 11:14 by ChemPharm
[考研] 生物学调剂 可调剂到生物与医药 +8 李政莹 2026-04-06 9/450 2026-04-11 10:36 by wwj2530616
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸,感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +21 好好休息好不好 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 16:58 by luoyongfeng
[考研] 314求调剂 +23 wakeluofu 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 15:31 by MOF_Catal
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +7 刘墨墨 2026-04-06 7/350 2026-04-10 08:11 by kangsm
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 求调剂 +15 熊二想上岸 2026-04-06 15/750 2026-04-08 04:53 by 无际的草原
[考研] 312求调剂 +18 gtw1 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 18:16 by 蓝云思雨
[考研] 328求调剂 +4 ghhh88888 2026-04-06 5/250 2026-04-07 14:45 by ghhh88888
[考研] 0854求调剂 +9 亨氏番茄沙司 2026-04-06 10/500 2026-04-07 14:37 by shdgaomin
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 求调剂到0856材料工程 +3 程9915 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:15 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见