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【求助/交流】双酶切连接问题
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大虾们,我最近用双酶切的方法对目的片段和质粒进行连接, 步骤是:先对两者进行双酶切,切胶回收,回收后电泳条带亮度差不多,位置正确,有点暗,但是肉眼可见,试了1:5,1:7,1:9,不同比例进行连接,化转后平板上都没有目的转化子,反而有杂菌菌落,很是郁闷,帮我分析下原因吧,先谢谢了哦 补充;我连接用的是宝生物的Soulution1,时间为20个小时左右 |
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