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baojunboy04

[交流] 微卫星遇到问题 已有1人参与

最近跑微卫星PCR一直跑不出来，只有引物二聚体，反复做过多次，单头多头都跑，很不稳定，偶尔能跑出，还请高人指教
微卫星的模板浓度最适是多少？
能否用微卫星的回收产物进行SSR-PCR？

[ Last edited by amisking on 2009-11-16 at 17:47 ]
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1楼 2009-11-16 14:53:36
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢交流 11-16 17:33
做不出来，呵呵，前面做过条件的筛选吗，影响pcr的因素有很多，可以先用单因素选择或者正交的方法筛选一下条件。
模板浓度对于pcr来说相对是较宽的，30--100ng/ml都是可以的。
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2楼2009-11-16 16:48:57
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢交流 11-16 17:33
微卫星的回收产物再做ssr-pcr也是可以的，稀释一下作为模板即可。
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3楼2009-11-16 16:50:56
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baojunboy04

引用回帖:
Originally posted by 小小豆豆 at 2009-11-16 16:48:
做不出来，呵呵，前面做过条件的筛选吗，影响pcr的因素有很多，可以先用单因素选择或者正交的方法筛选一下条件。
模板浓度对于pcr来说相对是较宽的，30--100ng/ml都是可以的。

用一个位点的回收产物可以用来跑其它位点的PCR吗？？谢谢
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4楼2009-11-16 16:54:45
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by baojunboy04 at 2009-11-16 16:54:

用一个位点的回收产物可以用来跑其它位点的PCR吗？？谢谢

不可以，因为你第一次扩出的结果，仅仅含有哪一个位点，所以用它来扩，也只能得到这一个位点的结果。
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5楼2009-11-16 21:31:59
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OTAKE

学习一下
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6楼2009-11-16 21:33:15
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smurfen

至尊木虫 (著名写手)
★
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灵敏度不够？
银染吗？
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Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
7楼2009-11-16 21:36:27
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baojunboy04

微卫星荧光标记就不用银染了
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8楼2009-11-17 14:10:49
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yaq_125

木虫 (正式写手)
可能是引物浓度问题吧，没有稀释吗？
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9楼2011-04-05 09:56:32
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