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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR刚开始扩的很好，后来就扩不出来了怎么回事？
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR刚开始扩的很好，后来就扩不出来了怎么回事？ 已有7人参与

第一次用的降落pcr,条带很清晰，跑了marker,确实是目的条带。可是仅仅隔了两天就死活扩不出来了！扩增条件和扩增体系都和两天前是一样的，酶是新的才用了几次不可能出问题的！也换了模板，换了电泳液和胶，也注意了混匀等细节还是p不出不来！
郁闷死了！
有没有有经验的指点一下？谢谢各位！

[ Last edited by amisking on 2010-8-14 at 22:28 ]
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1楼 2009-10-30 20:46:36
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Entrez1110

★
小木虫(金币+0.5):恭喜抢沙发，给个红包
引物有没有降解？
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2楼2009-10-30 20:50:33
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很可能是引物出问题了。
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生命的海洋里，我是蓝色的一滴
3楼2009-10-30 20:55:32
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by goodwish at 2009-10-30 20:55:
很可能是引物出问题了。

引物不会降解那么快吧？用了没有几次，再说我这前后也就隔了两天。
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4楼2009-10-30 21:01:49
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by Entrez1110 at 2009-10-30 20:50:
引物有没有降解？

引物是否降解有办法测定吗？
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5楼2009-10-30 21:02:39
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 彩云朵朵 at 2009-10-30 21:02:

引物是否降解有办法测定吗？

不知道测OD260能试下不？
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Thank-you，so-blue.
6楼2009-11-01 15:39:32
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
PCR这个东西不好说啊，即使影响的因素很多，这一次没P出来下一次很可能就P出来了。
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7楼2009-11-01 17:00:02
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zhouzhou_3006

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
使用不同浓度的模板试试
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为梦想努力。
8楼2009-11-01 19:26:16
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
换不同的人员试一试，可能是手法问题
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但愿人长久
9楼2009-11-02 08:46:03
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shenye.judy

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
把所有的东西都换一下！
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10楼2009-11-02 08:54:37
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