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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR刚开始扩的很好,后来就扩不出来了怎么回事? 已有7人参与

第一次用的降落pcr,条带很清晰,跑了marker,确实是目的条带。可是仅仅隔了两天就死活扩不出来了!扩增条件和扩增体系都和两天前是一样的,酶是新的才用了几次不可能出问题的!也换了模板,换了电泳液和胶,也注意了混匀等细节还是p不出不来!
郁闷死了!
有没有有经验的指点一下?谢谢各位!

[ Last edited by amisking on 2010-8-14 at 22:28 ]
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Entrez1110


小木虫(金币+0.5):恭喜抢沙发,给个红包
引物有没有降解?
2楼2009-10-30 20:50:33
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很可能是引物出问题了。
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
3楼2009-10-30 20:55:32
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by goodwish at 2009-10-30 20:55:
很可能是引物出问题了。

引物不会降解那么快吧?用了没有几次,再说我这前后也就隔了两天。
4楼2009-10-30 21:01:49
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by Entrez1110 at 2009-10-30 20:50:
引物有没有降解?

引物是否降解有办法测定吗?
5楼2009-10-30 21:02:39
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 彩云朵朵 at 2009-10-30 21:02:

引物是否降解有办法测定吗?

不知道测OD260能试下不?
Thank-you,so-blue.
6楼2009-11-01 15:39:32
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
PCR这个东西不好说啊,即使影响的因素很多,这一次没P出来下一次很可能就P出来了。
7楼2009-11-01 17:00:02
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zhouzhou_3006

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
使用不同浓度的模板试试
为梦想努力。
8楼2009-11-01 19:26:16
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
换不同的人员试一试,可能是手法问题
但愿人长久
9楼2009-11-02 08:46:03
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shenye.judy

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
把所有的东西都换一下!
10楼2009-11-02 08:54:37
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