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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR刚开始扩的很好，后来就扩不出来了怎么回事？
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yxx41

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 11-12 18:24
我以为是我太菜，原来也有和我一样菜的……
不行就像楼上说的整个推倒重来，不甘心就再试试。
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内事不决问百度，外事不决问Google，横批：wikipedia
11楼2009-11-02 09:19:30
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bioxixi

木虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-12 18:24
我只能说我也不知道原因
以前也遇到类似的情况，尝试很多，做后得出结论是多做几次，每天做一到两次，总会再出来的。。。
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12楼2009-11-02 09:36:35
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yxx41 at 2009-11-2 09:19:
我以为是我太菜，原来也有和我一样菜的……
不行就像楼上说的整个推倒重来，不甘心就再试试。

13楼2009-11-02 15:23:55
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by bioxixi at 2009-11-2 09:36:
我只能说我也不知道原因
以前也遇到类似的情况，尝试很多，做后得出结论是多做几次，每天做一到两次，总会再出来的。。。

我也坚信会出来的！
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14楼2009-11-05 16:45:31
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nocaackoei

银虫 (小有名气)
★
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pcr仪器出问题了吧
或者检查一下程序的设定。
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I can accept failure, but I can't accept injustice.
15楼2009-11-06 21:01:33
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nocaackoei at 2009-11-6 21:01:
pcr仪器出问题了吧
或者检查一下程序的设定。

程序是原先的没有改动，仪器别人用的好好的呢。
我现在是全部重新来了。郁闷
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16楼2009-11-10 10:38:48
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changes

木虫 (正式写手)
★
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换另一管引物试试，另外别人能扩增出条带吗？换个PCR仪试试。还有就是水的问题。
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17楼2009-11-10 11:06:47
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六妖妖

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 11-10 11:28
一般遇到这种事情，首先换酶。可以用其他人正在用，而且能做出结果的酶。虽然酶是新的，但不一定酶的质量就是好的。
然后是换模板。引物可以直接跑胶检测的。不知道你的引物稀释到怎样的情况。Touchdown是个不错的方法，但是我个人还是觉得若不是特别难P的东西，最好还是摸索出一个常规的PCR protocol会更好点。
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18楼2009-11-10 11:16:34
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nql_sdau

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物和PCR体系的药品都要分装1以防污染！再就是引物和TAq不要反复冻融！
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19楼2009-11-10 13:17:12
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nql_sdau at 2009-11-10 13:17:
引物和PCR体系的药品都要分装1以防污染！再就是引物和TAq不要反复冻融！

引物是分装的还好说  但是酶没法分装啊  你们是怎么弄的？谢谢啊！
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20楼2009-11-10 15:28:29
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