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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR刚开始扩的很好，后来就扩不出来了怎么回事？
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by changes at 2009-11-10 11:06:
换另一管引物试试，另外别人能扩增出条带吗？换个PCR仪试试。还有就是水的问题。

啊  水我没有换  好的 我换换看  谢谢啊
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21楼2009-11-10 15:29:27
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 六妖妖 at 2009-11-10 11:16:
一般遇到这种事情，首先换酶。可以用其他人正在用，而且能做出结果的酶。虽然酶是新的，但不一定酶的质量就是好的。
然后是换模板。引物可以直接跑胶检测的。不知道你的引物稀释到怎样的情况。Touchdown是个不错 ...

谢谢  开始我觉得反正Touchdown做出来了 就不用再去摸退火了  现在觉得也不是这么回事  后面就会麻烦了
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22楼2009-11-10 15:32:13
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zier1011

木虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-12 18:24
换台PCR仪试试看，
引物两天内降解的可能性不大
酶还是要用目前正在用，且没有问题的酶，新开的酶也不能保证一定行
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花还香香的
23楼2009-11-10 15:37:49
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benben486

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也出现过这种情况，呵呵，我的办法是放两天再做，环境条件很重要，有的还是可以重新做出来的，但有的就没这么幸运，
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24楼2009-11-11 13:53:32
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by benben486 at 2009-11-11 13:53:
我也出现过这种情况，呵呵，我的办法是放两天再做，环境条件很重要，有的还是可以重新做出来的，但有的就没这么幸运，

天气越来越冷了  早知道就连着做下来了

看来我不够幸运啊
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25楼2009-11-11 14:21:33
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liuhua703

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
坚持就是胜利，我这几天也是这样！加油啊！！！！
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26楼2009-11-12 13:12:00
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liuhua703 at 2009-11-12 13:12:
坚持就是胜利，我这几天也是这样！加油啊！！！！

谢谢----------
昨天10微升的体系做出来了   紧接着做50微升的就啥也没有-------
今天还在做  加油加油！！
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27楼2009-11-12 17:24:20
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winscavin

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
试剂污染  或者是反复解冻降解了
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28楼2009-11-12 18:16:40
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by winscavin at 2009-11-12 18:16:
试剂污染  或者是反复解冻降解了

昨天p的是试剂全部换了新的-------
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29楼2009-11-12 19:56:48
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
★
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跟我以前一样，我刚开始扩的很好，后来突然就扩不出来了，扩了半年，后来别人告诉我测模板浓度，就扩出来了。模板浓度一定不能太高，测浓度后，算成体积，一般加0.1——1微克的量，高一丁点都扩不出来的
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
30楼2010-08-14 20:58:58
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