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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR刚开始扩的很好,后来就扩不出来了怎么回事?已有7人参与

第一次用的降落pcr,条带很清晰,跑了marker,确实是目的条带。可是仅仅隔了两天就死活扩不出来了!扩增条件和扩增体系都和两天前是一样的,酶是新的才用了几次不可能出问题的!也换了模板,换了电泳液和胶,也注意了混匀等细节还是p不出不来!
郁闷死了!
有没有有经验的指点一下?谢谢各位!

[ Last edited by amisking on 2010-8-14 at 22:28 ]
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
跟我以前一样,我刚开始扩的很好,后来突然就扩不出来了,扩了半年,后来别人告诉我测模板浓度,就扩出来了。模板浓度一定不能太高,测浓度后,算成体积,一般加0.1——1微克的量,高一丁点都扩不出来的
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
30楼2010-08-14 20:58:58
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