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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR刚开始扩的很好,后来就扩不出来了怎么回事?已有7人参与

第一次用的降落pcr,条带很清晰,跑了marker,确实是目的条带。可是仅仅隔了两天就死活扩不出来了!扩增条件和扩增体系都和两天前是一样的,酶是新的才用了几次不可能出问题的!也换了模板,换了电泳液和胶,也注意了混匀等细节还是p不出不来!
郁闷死了!
有没有有经验的指点一下?谢谢各位!

[ Last edited by amisking on 2010-8-14 at 22:28 ]
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 六妖妖 at 2009-11-10 11:16:
一般遇到这种事情,首先换酶。可以用其他人正在用,而且能做出结果的酶。虽然酶是新的,但不一定酶的质量就是好的。
然后是换模板。引物可以直接跑胶检测的。不知道你的引物稀释到怎样的情况。Touchdown是个不错 ...

谢谢  开始我觉得反正Touchdown做出来了 就不用再去摸退火了  现在觉得也不是这么回事  后面就会麻烦了
22楼2009-11-10 15:32:13
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Entrez1110


小木虫(金币+0.5):恭喜抢沙发,给个红包
引物有没有降解?
2楼2009-10-30 20:50:33
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很可能是引物出问题了。
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
3楼2009-10-30 20:55:32
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by goodwish at 2009-10-30 20:55:
很可能是引物出问题了。

引物不会降解那么快吧?用了没有几次,再说我这前后也就隔了两天。
4楼2009-10-30 21:01:49
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