应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双酶切的酶量加多少？
111/2返回列表12下一页
查看: 1353  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

yoyoyehan

[交流] 双酶切的酶量加多少？

用的是TaKaRa的XbaI 和XhoI酶，20ul体系，XbaI  1ul
                                                                   XhoI  1ul
                                                                    10XM    2ul
                                                                       DNA  5ul
                                                                  ddH2O    11ul
请问各位虫友：有用过这两个酶的么？ 请问我的酶量加的对不？因为单酶切20ul体系中  Xbal和Xhol各是1ul。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-10-30 11:10:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑罕

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我做体系是
15ul体系，XbaI  0.5ul
               XhoI  0.5ul
              10XM    2ul
                DNA  视浓度而定l
       ddH2O     补足    15ul
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-10-30 12:51:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
按照说明书
另总酶量不超过总体积的10%
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-10-30 12:53:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yoyoyehan

引用回帖:
Originally posted by 黑罕 at 2009-10-30 12:51:
我做体系是
15ul体系，XbaI  0.5ul
               XhoI  0.5ul
              10XM    2ul
                DNA  视浓度而定l
       ddH2O     补足    15ul

请问你的酶切反应多长时间呀？ 我的是37度  6h ，但是我发现pet和目的片段酶切后 连接  转入DH5α中，怎么没有菌落长出呢？  是不是我的酶切没有切好呀？
赞一下 回复此楼
4楼2009-10-30 15:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Entrez1110

0.5uL足够了.
回复此楼
5楼2009-10-30 16:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqsvery

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你酶切时间有点短，一般我们下午做好，过夜，明天再转！
赞一下(1人) 回复此楼
谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。
6楼2009-10-30 16:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinhuali123

银虫 (小有名气)
我做连接也是不这么好，不知道到底是酶切不充分还是怎么的，过夜切了后的连接效果是不是很好？我以前过夜切过，不过电泳后感觉条带不怎么好。
赞一下 回复此楼
7楼2009-10-30 21:07:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
酶好像加0.5就可以了，DNA是看浓度的，浓度高就少加低就多加
赞一下(1人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
8楼2009-10-30 21:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpuwzq

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
0.5UL足矣。我一般切2h就够啦
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-10-31 14:01:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jgsghw

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要试DNA的浓度确定DNA的体积，我做了很多次双酶切，BamhI和HindIII，都是DNA的浓度不对
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-10-31 18:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yoyoyehan 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南科大生物学297分，求调剂推荐 +10 Y-yyusx 2026-04-06 11/550 2026-04-13 09:30 by mfyue2000
[考研] 314求调剂 +24 wakeluofu 2026-04-09 25/1250 2026-04-13 08:58 by lhj2009
[考研] 291 求调剂 +30 化工2026届毕业� 2026-04-09 30/1500 2026-04-13 08:52 by lhj2009
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 食品与营养（0955）271求调剂 +7 升格阿达 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:56 by yuyin1233
[考研] 求调剂，985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 13/650 2026-04-12 22:40 by 涵竹刘
[考研] 277 数一104，学硕，求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550， 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 292求调剂 +9 笑笑袁 2026-04-09 9/450 2026-04-10 10:05 by LHGeng
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 材料工程322 +18 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 19/950 2026-04-09 10:44 by cymywx
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +15 a1708 2026-04-06 15/750 2026-04-08 16:23 by luoyongfeng
[考研] 304求调剂 +10 素年祭语 2026-04-06 17/850 2026-04-08 09:05 by 蓝云思雨
[考研] 22408 318分求调剂 +4 勤奋的小笼包 2026-04-06 6/300 2026-04-07 15:05 by 纸鹤555
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭