应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双酶切的酶量加多少？
111/2返回列表12下一页
查看: 1412  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

yoyoyehan

[交流] 双酶切的酶量加多少？

用的是TaKaRa的XbaI 和XhoI酶，20ul体系，XbaI  1ul
                                                                   XhoI  1ul
                                                                    10XM    2ul
                                                                       DNA  5ul
                                                                  ddH2O    11ul
请问各位虫友：有用过这两个酶的么？ 请问我的酶量加的对不？因为单酶切20ul体系中  Xbal和Xhol各是1ul。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-10-30 11:10:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑罕

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我做体系是
15ul体系，XbaI  0.5ul
               XhoI  0.5ul
              10XM    2ul
                DNA  视浓度而定l
       ddH2O     补足    15ul
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-10-30 12:51:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
按照说明书
另总酶量不超过总体积的10%
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-10-30 12:53:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yoyoyehan

引用回帖:
Originally posted by 黑罕 at 2009-10-30 12:51:
我做体系是
15ul体系，XbaI  0.5ul
               XhoI  0.5ul
              10XM    2ul
                DNA  视浓度而定l
       ddH2O     补足    15ul

请问你的酶切反应多长时间呀？ 我的是37度  6h ，但是我发现pet和目的片段酶切后 连接  转入DH5α中，怎么没有菌落长出呢？  是不是我的酶切没有切好呀？
赞一下 回复此楼
4楼2009-10-30 15:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Entrez1110

0.5uL足够了.
回复此楼
5楼2009-10-30 16:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqsvery

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你酶切时间有点短，一般我们下午做好，过夜，明天再转！
赞一下(1人) 回复此楼
谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。
6楼2009-10-30 16:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinhuali123

银虫 (小有名气)
我做连接也是不这么好，不知道到底是酶切不充分还是怎么的，过夜切了后的连接效果是不是很好？我以前过夜切过，不过电泳后感觉条带不怎么好。
赞一下 回复此楼
7楼2009-10-30 21:07:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
酶好像加0.5就可以了，DNA是看浓度的，浓度高就少加低就多加
赞一下(1人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
8楼2009-10-30 21:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpuwzq

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
0.5UL足矣。我一般切2h就够啦
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-10-31 14:01:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jgsghw

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要试DNA的浓度确定DNA的体积，我做了很多次双酶切，BamhI和HindIII，都是DNA的浓度不对
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-10-31 18:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yoyoyehan 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 5/250 2026-05-24 16:21 by hhx1yx9evi
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 4/200 2026-05-24 16:16 by hhx1yx9evi
[基金申请] 河北省自然科学基金 +6 Peterchao 2026-05-18 9/450 2026-05-24 16:02 by 130067131
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 pmo95bazuy 2026-05-23 8/400 2026-05-24 15:56 by 1uy1ht2y9r
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 论文撤稿了 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:06 by Equinoxhua
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路！ +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 08:01 by 9ps9vgkqva
[基金申请] 揭秘青基评审内幕：几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +4 希冀，有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀，有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭