应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双酶切的酶量加多少？
111/2返回列表12下一页
查看: 1346  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

yoyoyehan

[交流] 双酶切的酶量加多少？

用的是TaKaRa的XbaI 和XhoI酶，20ul体系，XbaI  1ul
                                                                   XhoI  1ul
                                                                    10XM    2ul
                                                                       DNA  5ul
                                                                  ddH2O    11ul
请问各位虫友：有用过这两个酶的么？ 请问我的酶量加的对不？因为单酶切20ul体系中  Xbal和Xhol各是1ul。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-10-30 11:10:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑罕

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我做体系是
15ul体系，XbaI  0.5ul
               XhoI  0.5ul
              10XM    2ul
                DNA  视浓度而定l
       ddH2O     补足    15ul
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-10-30 12:51:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
按照说明书
另总酶量不超过总体积的10%
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-10-30 12:53:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yoyoyehan

引用回帖:
Originally posted by 黑罕 at 2009-10-30 12:51:
我做体系是
15ul体系，XbaI  0.5ul
               XhoI  0.5ul
              10XM    2ul
                DNA  视浓度而定l
       ddH2O     补足    15ul

请问你的酶切反应多长时间呀？ 我的是37度  6h ，但是我发现pet和目的片段酶切后 连接  转入DH5α中，怎么没有菌落长出呢？  是不是我的酶切没有切好呀？
赞一下 回复此楼
4楼2009-10-30 15:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Entrez1110

0.5uL足够了.
回复此楼
5楼2009-10-30 16:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqsvery

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你酶切时间有点短，一般我们下午做好，过夜，明天再转！
赞一下(1人) 回复此楼
谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。
6楼2009-10-30 16:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinhuali123

银虫 (小有名气)
我做连接也是不这么好，不知道到底是酶切不充分还是怎么的，过夜切了后的连接效果是不是很好？我以前过夜切过，不过电泳后感觉条带不怎么好。
赞一下 回复此楼
7楼2009-10-30 21:07:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
酶好像加0.5就可以了，DNA是看浓度的，浓度高就少加低就多加
赞一下(1人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
8楼2009-10-30 21:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpuwzq

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
0.5UL足矣。我一般切2h就够啦
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-10-31 14:01:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jgsghw

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要试DNA的浓度确定DNA的体积，我做了很多次双酶切，BamhI和HindIII，都是DNA的浓度不对
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-10-31 18:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yoyoyehan 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +12 drizzle_9 2026-04-12 13/650 2026-04-13 01:15 by 幸免 ..
[考研] 290求调剂 +14 柯淮然 2026-04-12 16/800 2026-04-12 19:22 by dan_wang
[考研] 材料与化工300求调剂 +39 肖开文 2026-04-09 43/2150 2026-04-12 01:30 by 秋豆菜芽
[考研] 0860004 求调剂 309分 +9 Yin DY 2026-04-08 9/450 2026-04-11 22:55 by dongdian1
[考研] 求调剂 +11 月@163.com 2026-04-07 13/650 2026-04-11 22:55 by BruceLiu320
[考研] 求调剂 +6 小聂爱学习 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:20 by 蓝云思雨
[考研] 296求调剂 +8 汪！？！ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:02 by 逆水乘风
[考研] 求调剂，一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 农学0904 312求调剂 +6 Say Never 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:33 by wwj2530616
[考研] 275求调剂 +9 1624447980 2026-04-08 10/500 2026-04-11 10:20 by Delta2012
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 材料类284调剂 +40 想换手机不想解� 2026-04-08 48/2400 2026-04-10 23:28 by 314126402
[考研] 一志愿京区985，085401，与本科专业一致，电子信息工程， +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[基金申请] 有爆料，一个青年教师卖房得400万，然后换了一个四青帽子 +9 babu2015 2026-04-08 9/450 2026-04-10 11:43 by 苏东坡二世
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 327求调剂 +12 Xxjc1107. 2026-04-06 12/600 2026-04-08 16:46 by luoyongfeng
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 09:25 by 小黑不怕难
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭