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yoyoyehan

应助: (幼儿园)
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[交流] 双酶切的酶量加多少？

用的是TaKaRa的XbaI 和XhoI酶，20ul体系，XbaI  1ul
                                                               XhoI  1ul
                                                                  10XM 2ul
                                                                     DNA  5ul
                                                               ddH2O 11ul
请问各位虫友：有用过这两个酶的么？请问我的酶量加的对不？因为单酶切20ul体系中  Xbal和Xhol各是1ul。

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1楼 2009-10-30 11:10:08

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yoyoyehan

应助: (幼儿园)
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虫号: 806220

引用回帖:

Originally posted by 黑罕 at 2009-10-30 12:51:
我做体系是
15ul体系，XbaI  0.5ul
            XhoI  0.5ul
            10XM 2ul
            DNA  视浓度而定l
   ddH2O    补足 15ul

请问你的酶切反应多长时间呀？我的是37度 6h ，但是我发现pet和目的片段酶切后连接转入DH5α中，怎么没有菌落长出呢？是不是我的酶切没有切好呀？