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2011218421新虫 (初入文坛)
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蛋白透析复性析出 已有3人参与
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就是包涵体蛋白进行透析复性,复性液梯度是 6M 4M 2M 1M 0M,但是蛋白一到 2M 就析出,这是什么原因啊,也尝试过加了 3M 依旧是 2M 的时候析出,用的是尿素溶解包涵体 @starseacow 发自小木虫Android客户端 |
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新虫 (初入文坛)
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【答案】应助回帖
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包含体蛋白的纯化,简直有点像玄学一样的存在。虽然大肠杆菌的表达量会大很多,但是强烈建议如果为了纯化活性蛋白的话,用昆虫细胞或者使用哺乳动物细胞会好很多,尤其是如果表达分泌蛋白,其实从培养基上清里面纯化这些分泌蛋白也挺方便的。如果你一定要用大肠杆菌的话,我建议你还是优化诱导表达条件,让他能够慢慢的表达。再者就是可以给蛋白加一些比较大的那个标签,降低聚集的可能性。 发自小木虫手机客户端 |

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