24小时热门版块排行榜    

查看: 1061  |  回复: 12
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

meizixijun

金虫 (小有名气)

[交流] 我的重组菌为啥不长?

我的载体是pET28a(+),连接一个大约1600bp的基因,可是就是转化不出。感受态对照(转化时只加感受态细胞,其他步骤都一样)在含kana平板上不长,在不含kana的平板上长,这说明感受态制备没问题,那是什么原因导致重组菌不长呢?知道的请帮帮忙啊!是连接出问题吗?我是16度连接16~24h,就是长也就长一株,我快郁闷死了。我的宿主菌直接用BL21的,这个有关系吗?听说一般都先用DH5a

[ Last edited by amisking on 2009-10-25 at 19:20 ]
回复此楼
追求梦想,快乐着我的快乐
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
小木虫之有关部门负责人
7楼2009-10-26 19:22:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by meizixijun at 2009-10-25 18:48:
我的载体是pET28a(+),连接一个大约1600bp的基因,可是就是转化不出。感受态对照(转化时只加感受态细胞,其他步骤都一样)在含kana平板上不长,在不含kana的平板上长,这说明感受态制备没问题,那是什么原因导致重 ...

用Bl21没有问题的。我觉得你做的对照并不能说明你的感受没有问题,很有可能是你的感受态效率太低,或者直接不行了的原因,你做的对照只能说明你的菌为bl21,不能说明他的效率。建议你做的转空质粒的对照试试,如果还不长,说明感受态出问题了!还有就是没有用错抗性板吧?
2楼2009-10-25 20:08:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
宿主没有问题,很有可能是连接出问题了,你也提到了,就是长也长一株
3楼2009-10-25 20:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjlbest

木虫 (著名写手)

应该是连接出问题。
4楼2009-10-25 22:24:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +12 医学老男孩 2026-08-13 31/1550 2026-08-14 07:47 by 医学老男孩
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +69 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 72/3600 2026-08-14 07:45 by u5Hy7ZmCpaka
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 29/1450 2026-08-14 07:42 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见