24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 937  |  回复: 12
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

meizixijun

金虫 (小有名气)

[交流] 我的重组菌为啥不长?

我的载体是pET28a(+),连接一个大约1600bp的基因,可是就是转化不出。感受态对照(转化时只加感受态细胞,其他步骤都一样)在含kana平板上不长,在不含kana的平板上长,这说明感受态制备没问题,那是什么原因导致重组菌不长呢?知道的请帮帮忙啊!是连接出问题吗?我是16度连接16~24h,就是长也就长一株,我快郁闷死了。我的宿主菌直接用BL21的,这个有关系吗?听说一般都先用DH5a

[ Last edited by amisking on 2009-10-25 at 19:20 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

追求梦想,快乐着我的快乐
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
宿主没有问题,很有可能是连接出问题了,你也提到了,就是长也长一株
3楼2009-10-25 20:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by meizixijun at 2009-10-25 18:48:
我的载体是pET28a(+),连接一个大约1600bp的基因,可是就是转化不出。感受态对照(转化时只加感受态细胞,其他步骤都一样)在含kana平板上不长,在不含kana的平板上长,这说明感受态制备没问题,那是什么原因导致重 ...

用Bl21没有问题的。我觉得你做的对照并不能说明你的感受没有问题,很有可能是你的感受态效率太低,或者直接不行了的原因,你做的对照只能说明你的菌为bl21,不能说明他的效率。建议你做的转空质粒的对照试试,如果还不长,说明感受态出问题了!还有就是没有用错抗性板吧?
2楼2009-10-25 20:08:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjlbest

木虫 (著名写手)

应该是连接出问题。
4楼2009-10-25 22:24:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzuxhq368

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用哪家的酶,连接片段的浓度、比例等,都会影响连接效果
5楼2009-10-25 22:37:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +9 困困困困坤坤 2026-04-14 10/500 2026-04-15 10:21 by 喑哑茗香
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +42 xaw. 2026-04-11 43/2150 2026-04-15 09:57 by ssssjqrr
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 54/2700 2026-04-14 18:00 by lhj2009
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 农学0904 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-11 4/200 2026-04-14 09:10 by zs92450
[考研] 2本,初试303,0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 322求调剂 +6 123安康 2026-04-12 13/650 2026-04-12 15:51 by 123安康
[考研] 280求调剂 +13 wzzz王 2026-04-09 13/650 2026-04-12 00:31 by 勇攀高峰0126
[考研] 药学专硕调剂 +8 ? 一路生?花? 2026-04-10 10/500 2026-04-11 21:21 by zhouxiaoyu
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 293求调剂 +6 勇远库爱314 2026-04-08 6/300 2026-04-11 10:08 by zhq0425
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 一志愿华东师范生物学326分,求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550, 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 085501机械英二77总分294求调剂,接受跨专业学习 +6 守法公民亓纪 2026-04-08 6/300 2026-04-09 15:55 by wp06
信息提示
请填处理意见