应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何给DNA片段加link
141/2返回列表12下一页
查看: 1092  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

lihaoexe

银虫 (小有名气)

[交流] 如何给DNA片段加link

如题，我想在一些50-100bp之间的DNA片段两端加上一段序列，以便于筛选后做PCR。有没有公司做这样的服务的啊？急求！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-10-22 13:59:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by lihaoexe at 2009-10-22 13:59:
如题，我想在一些50-100bp之间的DNA片段两端加上一段序列，以便于筛选后做PCR。有没有公司做这样的服务的啊？急求！

直接做PCR检测不行吗？是不是你想在不同的序列上加上不同长度的序列以便于检测呢？
赞一下 回复此楼
2楼2009-10-22 14:53:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihaoexe

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-22 14:53:

直接做PCR检测不行吗？是不是你想在不同的序列上加上不同长度的序列以便于检测呢？

不行啊，我不知道片段的序列啊，而且我这是DNA片段的混合物，相当于一个文库，我是想在其中筛选出我所要的片段然后PCR，测序
赞一下 回复此楼
3楼2009-10-22 15:35:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

350784478

木虫 (正式写手)
照你这么一说，还是比较麻烦的。
赞一下 回复此楼
朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
4楼2009-10-22 15:54:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★
lihaoexe(金币+3,VIP+0):筛选不是问题，我有筛选方法，关键是筛选后用PCR把得到的DNA片段扩增 10-22 16:50
连T做单克隆怎么样？多筛重组子测序，估计工作量很大，而且你的片段也太短。
另外DGGE好像能够将长度一样，序列不一样的片段分离开，不知道可行不。

[ Last edited by susizheng on 2009-10-22 at 16:36 ]
赞一下(2人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
5楼2009-10-22 16:34:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihaoexe

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-10-22 16:34:
连T做单克隆怎么样？多筛重组子测序，估计工作量很大，而且你的片段也太短。
另外DGGE好像能够将长度一样，序列不一样的片段分离开，不知道可行不。

[ Last edited by susizheng on 2009-10-22 at 16:36 ]

筛选不是问题，我有筛选方法，关键是筛选后用PCR把得到的DNA片段扩增
赞一下 回复此楼
6楼2009-10-22 16:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★ ★ ★
lihaoexe(金币+5,VIP+0): 10-22 17:12
你在片段两端加序列的目的是什么？筛选后，根据你所加的序列设计引物做PCR，将DNA片段扩增？
如果是这样的话，连T挑单克隆，富集本身也是你连进条带的扩增过程。
另外也可以以重组子为模板，利用T载通用引物，也可以扩增你的DNA片段。
不知道我这样理解正确不？
赞一下(5人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
7楼2009-10-22 17:04:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihaoexe

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-10-22 17:04:
你在片段两端加序列的目的是什么？筛选后，根据你所加的序列设计引物做PCR，将DNA片段扩增？
如果是这样的话，连T挑单克隆，富集本身也是你连进条带的扩增过程。
另外也可以以重组子为模板，利用T载通用引物，也 ...

首先，加序列的目的就是便于PCR。其次，用T载体的话，如果在筛选后连T载体，我筛选得到的DNA片段量实在太低不足以做链接，这也正是要PCR扩增的原因；如果是在筛选前连T载体，那么挑单克隆只能得到单一片段，不能筛选到我要的片段。不过还是谢谢你的建议
赞一下 回复此楼
8楼2009-10-22 17:12:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★ ★ ★
生命核心(金币+1,VIP+0):欢迎交流！ 10-22 20:22
lihaoexe(金币+2,VIP+0): 10-22 22:49
你好像吧问题说的太复杂了，不知道你的意思是不是，你知道一段DNA的序列但不知道它前面的和后面的，现在你想知道？如果是这个样子的话，那很容易就会克隆到两头未知序列啊，你先回复我，是不是我说的这个意思，然后再跟你进一步讨论
赞一下(10人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
9楼2009-10-22 19:52:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihaoexe

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2009-10-22 19:52:
你好像吧问题说的太复杂了，不知道你的意思是不是，你知道一段DNA的序列但不知道它前面的和后面的，现在你想知道？如果是这个样子的话，那很容易就会克隆到两头未知序列啊，你先回复我，是不是我说的这个意思，然 ...

不是的，直接说就是我提取了基因组DNA，然后将其打断成了100bp左右的片段，我想在这些片段两端加一段已知序列。
不好意思，可能表述的太复杂了
赞一下 回复此楼
10楼2009-10-22 20:25:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lihaoexe 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +3 医学老男孩 2026-08-13 6/300 2026-08-13 14:38 by 超级海虾
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] FileCode能看出啥？ +8 要乐观耀哥 2026-08-10 26/1300 2026-08-13 12:01 by Tide man
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭