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lihaoexe

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[交流] 如何给DNA片段加link

如题，我想在一些50-100bp之间的DNA片段两端加上一段序列，以便于筛选后做PCR。有没有公司做这样的服务的啊？急求！

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1楼2009-10-22 13:59:45

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lihaoexe

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引用回帖:

Originally posted by susizheng at 2009-10-22 17:04:
你在片段两端加序列的目的是什么？筛选后，根据你所加的序列设计引物做PCR，将DNA片段扩增？
如果是这样的话，连T挑单克隆，富集本身也是你连进条带的扩增过程。
另外也可以以重组子为模板，利用T载通用引物，也 ...

首先，加序列的目的就是便于PCR。其次，用T载体的话，如果在筛选后连T载体，我筛选得到的DNA片段量实在太低不足以做链接，这也正是要PCR扩增的原因；如果是在筛选前连T载体，那么挑单克隆只能得到单一片段，不能筛选到我要的片段。不过还是谢谢你的建议