应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pcr测序的结果BLAST后没有相似序列？？
211/3返回列表123下一页
查看: 1320  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

fykxy_206

木虫 (正式写手)

[交流] pcr测序的结果BLAST后没有相似序列？？

我用的英文文献上的引物做的PCR，跑出条带后250bp，和文献中的条带大一点，送去测序，测序的结果显示在NCBI中的几个数据库中BLAST没有和我的序列相似的序列，这是为什么呢？我不是很愿意相信我的序列是新序列，谁能帮我分析一下呢？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-10-14 13:49:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fykxy_206

木虫 (正式写手)
怎么没有人知道呢？金币不是问题啊！
赞一下 回复此楼
2楼2009-10-14 15:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):有引物序列，我不是很想要新序列！ 10-15 08:15
做了克隆再测序的吗？有没有发现引物序列？
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2009-10-14 16:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nnxqwei

至尊木虫 (职业作家)
★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):新序列对我没有多大用，我想要的序列不是那个啊！ 10-15 08:16
如果你的测序没问题的话，数据库里没有与你序列相似的，那么有可能你得到是一个新的序列哦。。。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2009-10-15 00:09:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fykxy_206

木虫 (正式写手)
继续求助！！
回复此楼
5楼2009-10-15 08:17:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

独头蒜8779

木虫 (小有名气)
★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):我试过了，只有20多个碱基与数据库的有相似其他的都不相似。 10-15 09:09
可以取你这个片段里的一部分，比如说一个表位，看下数据库里有没有
数据库这东西还是比较死的
但按LZ说的，连相似的序列都没有，那可真要仔细研究研究了
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2009-10-15 08:26:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

paulajjh

木虫 (著名写手)
★ ★
fykxy_206(金币+2,VIP+0):我的测序长度是230左右，只有两断长约20bp的有相似的。其他没有同源性可言。用的是宝生物的Taq酶，经两次测序结果相同。 10-15 09:12
你说的没有和你的一样的序列，那同源性最高的是多少啊？有没可能你的PCR中发生突变，你用的什么酶啊？或者测序结果不可信。最后一种可能你的是新序列。那就恭喜LZ了
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2009-10-15 08:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):是非特异性的扩增？我用引物在BLAST中比对过，特异性很好，只要有就应该是这个基因的一部分吧？ 10-15 12:25
如果有引物序列，但引物之间的又不是你要的，答案就是非特异扩增
其实我不大相信文献引物的……还是自己设计的放心
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2009-10-15 09:22:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioxixi

木虫 (著名写手)
★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):为什么是扩增的问题？我的复性温度53，应该不会使非特异扩增吧？ 10-15 12:26
没有相似的序列?
很奇怪啊 引物有没？
再做一次或另挑一个克隆测序呢
应该是扩增的问题吧
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-10-15 09:31:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fykxy_206

木虫 (正式写手)
扩增的序列比如说是这样的顺序：1234567890和数据库中的序列0987654321比对能显示是100%的相似吗？我的意思是说我测序的顺序如果是反的，那能比对出来吗？
赞一下 回复此楼
10楼2009-10-15 12:31:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fykxy_206 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +8 花田半亩～白 2026-04-21 8/400 2026-04-22 14:59 by jiaoxg
[考研] 0854求调剂 +24 门路摸摸 2026-04-15 28/1400 2026-04-22 09:54 by Sy199704！
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭