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食品考研!

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 未诱导的和诱导的蛋白表达一样多 已有1人参与

载体pet28a IPTG诱导 0.2-0.6mM,菌体长到0.78OD时开始诱导,诱导温度37℃,诱导时间6小时,发现加了IPTG的诱导组菌体长得少,所以统一诱导组和未诱导组OD值,取菌液进行离心加上样缓冲液煮沸之后跑电泳。结果发现未诱导的比诱导的蛋白表达都高。蛋白条带预测40kDa,位置也对。所以对后续蛋白过柱纯化有影响么

原核表达 未诱导的和诱导的蛋白表达一样多
微信图片_20230725095911.png
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很大几率是没有影响的,leak expression水平很高;可以考虑换PlySs等来控制背景表达(leak expression)的水平。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2023-07-25 14:58:23
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daiyanfa

铜虫 (小有名气)

做了western blot 实验证明确实是一样的蛋白吗

发自小木虫Android客户端
想成功就得去努力,奋斗,坚持
3楼2023-09-08 05:53:52
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