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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 原核表达 未诱导的和诱导的蛋白表达一样多
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食品考研！

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 未诱导的和诱导的蛋白表达一样多 已有1人参与

载体pet28a IPTG诱导 0.2-0.6mM，菌体长到0.78OD时开始诱导，诱导温度37℃，诱导时间6小时，发现加了IPTG的诱导组菌体长得少，所以统一诱导组和未诱导组OD值，取菌液进行离心加上样缓冲液煮沸之后跑电泳。结果发现未诱导的比诱导的蛋白表达都高。蛋白条带预测40kDa，位置也对。所以对后续蛋白过柱纯化有影响么

原核表达 未诱导的和诱导的蛋白表达一样多
微信图片_20230725095911.png
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1楼 2023-07-25 10:30:16
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daiyanfa

铜虫 (小有名气)
做了western blot 实验证明确实是一样的蛋白吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
想成功就得去努力，奋斗，坚持
3楼2023-09-08 05:53:52
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很大几率是没有影响的，leak expression水平很高；可以考虑换PlySs等来控制背景表达（leak expression）的水平。
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2023-07-25 14:58:23
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