24小时热门版块排行榜    

查看: 1104  |  回复: 2
【悬赏金币】回答本帖问题,作者食品考研!将赠送您 5 个金币

食品考研!

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 未诱导的和诱导的蛋白表达一样多 已有1人参与

载体pet28a IPTG诱导 0.2-0.6mM,菌体长到0.78OD时开始诱导,诱导温度37℃,诱导时间6小时,发现加了IPTG的诱导组菌体长得少,所以统一诱导组和未诱导组OD值,取菌液进行离心加上样缓冲液煮沸之后跑电泳。结果发现未诱导的比诱导的蛋白表达都高。蛋白条带预测40kDa,位置也对。所以对后续蛋白过柱纯化有影响么

原核表达 未诱导的和诱导的蛋白表达一样多
微信图片_20230725095911.png
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很大几率是没有影响的,leak expression水平很高;可以考虑换PlySs等来控制背景表达(leak expression)的水平。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2023-07-25 14:58:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daiyanfa

铜虫 (小有名气)

做了western blot 实验证明确实是一样的蛋白吗

发自小木虫Android客户端
想成功就得去努力,奋斗,坚持
3楼2023-09-08 05:53:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 食品考研! 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +6 且听虎啸 2026-08-17 7/350 2026-08-22 19:46 by JChen2024
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +3 简单化xn 2026-08-22 7/350 2026-08-22 19:46 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 8/400 2026-08-22 18:29 by 淀粉搬运工
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +10 羊腰板 2026-08-21 10/500 2026-08-22 17:11 by 玲珑133
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见