| 查看: 1792 | 回复: 5 | |||
[交流]
为什么我的融合PCR总是失败 已有2人参与
|
|
各位大佬，有人知道融合PCR具体怎么做好吗，重叠部分大概多长合适，然后两条模板的量大概要加多少，比如50ul体系，200ng/ul的1000bp的模板应该加多少，预反应的话有什么注意的 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有190人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
泡沫12
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 924.4
- 散金: 5
- 帖子: 142
- 在线: 60.2小时
- 虫号: 3215778
- 注册: 2014-05-18
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
A和B片段我一般overlap 30 bp，50ul体系各加200ng，不加引物，PCR 10个循环，之后取2ul做模板，各加1.5ul上下游引物，进行PCR 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2023-04-25 23:16:04
Glenice Y
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1547.7
- 散金: 50
- 沙发: 4
- 帖子: 555
- 在线: 72.1小时
- 虫号: 25353622
- 注册: 2021-02-27
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
这个实验要注意的细节很多，尤其是同源臂的设计长度，一般我是按照1:1加 这时候你要按照长度计算，加入量的确定，其实一般很少的量就可以了10ng这样子 发自小木虫Android客户端 |
3楼2023-04-25 23:56:41
4楼2023-04-26 00:12:16
5楼2023-04-26 00:14:47
泡沫12
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 924.4
- 散金: 5
- 帖子: 142
- 在线: 60.2小时
- 虫号: 3215778
- 注册: 2014-05-18
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2023-04-26 21:03:16
10