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SYP881130银虫 (小有名气)
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[交流]
【求助】关于DNS测定还原糖，进行测吸光值的问题，请教高人指教，非诚勿扰！
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本人在做DNS测还原糖的实验时，由于实验过程中遇到所测样品本身就有颜色，这到底对后期中测定吸光值是否有影响？？？ 当然很多人第一反应都认为会有，但有个师姐给了个说法——DNS与还原糖作用，它的生色基团是在测定所设定的波长处有特征吸收的，如果空白样（DNS+有色样品）在所设波长无吸收应该就无影响！————有点赞同！ 自己也在想方法尝试消除干扰！ 个人对这个分光光度计在深层次的原理不是很了解（主要是类似上述有色基团吸光作用原理），还有我上述的因素若有影响如何设计实验步骤进行消除，希望高手给个权威的指教，非诚勿扰！ 还有本人周一至周五实习，周五或周末晚都会上网，61774166，望君者赐教！！！谢谢！ |
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SYP881130
银虫 (小有名气)
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4楼2009-09-20 14:55:06
liujunhero
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SYP881130(金币+2):谢谢参与
SYP881130(金币+4,VIP+0):其实今天做了，数据说明对实验影响可以忽略，准确点说要看待测样品的具体颜色，有些确实有影响，而我的淡黄色和淡棕色的没什么影响，在520下的吸收差值与仪器波动造成的差值相当，可以忽略！其实我个人认为还是要看待测液具体的生色基团！而且波长范围从440-560都会有响应（是吸收曲线的中间部分），520-550是比较可信的！ 9-20 14:54
SYP881130(金币+2):谢谢参与
SYP881130(金币+4,VIP+0):其实今天做了，数据说明对实验影响可以忽略，准确点说要看待测样品的具体颜色，有些确实有影响，而我的淡黄色和淡棕色的没什么影响，在520下的吸收差值与仪器波动造成的差值相当，可以忽略！其实我个人认为还是要看待测液具体的生色基团！而且波长范围从440-560都会有响应（是吸收曲线的中间部分），520-550是比较可信的！ 9-20 14:54
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样品自身的颜色肯定是有影响的啊 你师姐只说对了一半，一般样品在480nm处都是有吸收的呢 最好的办法就是扣除样品的吸光度值 用蒸馏水替代DNS试剂，比如原来是1ml样品+2mlDNS，现在换成1ml样品+2ml蒸馏水 这样测量得到吸光度值为A1 而1ml样品+2mlDNS的吸光度值为A2 A2-A1即为你样品的真实的还原糖含量的吸光度值 相信我没错的 |
2楼2009-09-20 13:58:45
SYP881130
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3楼2009-09-20 14:33:28
liujunhero
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5楼2009-09-21 12:31:26
10