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SYP881130

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于DNS测定还原糖,进行测吸光值的问题,请教高人指教,非诚勿扰!

本人在做DNS测还原糖的实验时,由于实验过程中遇到所测样品本身就有颜色,这到底对后期中测定吸光值是否有影响???
当然很多人第一反应都认为会有,但有个师姐给了个说法——DNS与还原糖作用,它的生色基团是在测定所设定的波长处有特征吸收的,如果空白样(DNS+有色样品)在所设波长无吸收应该就无影响!————有点赞同!
自己也在想方法尝试消除干扰!
个人对这个分光光度计在深层次的原理不是很了解(主要是类似上述有色基团吸光作用原理),还有我上述的因素若有影响如何设计实验步骤进行消除,希望高手给个权威的指教,非诚勿扰!
还有本人周一至周五实习,周五或周末晚都会上网,61774166,望君者赐教!!!谢谢!
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不敢从心所欲!!!
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SYP881130

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liujunhero at 2009-9-20 13:58:
样品自身的颜色肯定是有影响的啊
你师姐只说对了一半,一般样品在480nm处都是有吸收的呢
最好的办法就是扣除样品的吸光度值
用蒸馏水替代DNS试剂,比如原来是1ml样品+2mlDNS,现在换成1ml样品+2ml蒸馏水
这样 ...

恩,好的,我试试!
不敢从心所欲!!!
3楼2009-09-20 14:33:28
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献

★ ★ ★ ★ ★
SYP881130(金币+2):谢谢参与
SYP881130(金币+4,VIP+0):其实今天做了,数据说明对实验影响可以忽略,准确点说要看待测样品的具体颜色,有些确实有影响,而我的淡黄色和淡棕色的没什么影响,在520下的吸收差值与仪器波动造成的差值相当,可以忽略!其实我个人认为还是要看待测液具体的生色基团!而且波长范围从440-560都会有响应(是吸收曲线的中间部分),520-550是比较可信的! 9-20 14:54
样品自身的颜色肯定是有影响的啊
你师姐只说对了一半,一般样品在480nm处都是有吸收的呢
最好的办法就是扣除样品的吸光度值
用蒸馏水替代DNS试剂,比如原来是1ml样品+2mlDNS,现在换成1ml样品+2ml蒸馏水
这样测量得到吸光度值为A1
而1ml样品+2mlDNS的吸光度值为A2
A2-A1即为你样品的真实的还原糖含量的吸光度值
相信我没错的
2楼2009-09-20 13:58:45
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SYP881130

银虫 (小有名气)

今天做了,数据说明对实验影响可以忽略,准确点说要看待测样品的具体颜色,有些确实有影响,而我的淡黄色和淡棕色的没什么影响,在520下的吸收差值与仪器波动造成的差值相当,可以忽略!其实我个人认为还是要看待测液具体的生色基团!而且波长范围从440-560都会有响应(是吸收曲线的中间部分),520-550是比较可信的!
不敢从心所欲!!!
4楼2009-09-20 14:55:06
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献


opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流,欢迎常来分析版 11-2 22:24
引用回帖:
Originally posted by SYP881130 at 2009-9-20 14:55:
今天做了,数据说明对实验影响可以忽略,准确点说要看待测样品的具体颜色,有些确实有影响,而我的淡黄色和淡棕色的没什么影响,在520下的吸收差值与仪器波动造成的差值相当,可以忽略!其实我个人认为还是要看待 ...

只要看DNS测定波长上是否有样品吸收即可,有的话就扣除掉
5楼2009-09-21 12:31:26
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