应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 实验讨论 » DEAE纯化蛋白
51/1返回列表
查看: 3540  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者rzrzbs将赠送您 13 个金币
本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

rzrzbs

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE纯化蛋白

最近在用DEAE-52纯化蛋白，蛋白等电点大概为4.5因为蛋白溶解性不是很好，所以想用较高ph溶液溶（ph12.5的磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液），并用这个缓冲液作为初始缓冲液以及含盐流动相，不知道可不可以

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-11-05 00:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rzrzbs

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2022-11-14 13:51:33
不理解为什么跑不出来，我没遇到过这个情况，你这个蛋白质是酶吗？是什么蛋白质？

不是酶，是个谷物蛋白

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2022-11-15 15:07:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

你是怎么知道你蛋白质的等电点的？

用这么碱性的缓冲液，你的蛋白质会不会失活？有没有做过预备实验？这个条件下，填料是不是比较受考验？快到耐受范围的尽头了吧？
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2022-11-07 21:44:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rzrzbs

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2022-11-07 21:44:02
你是怎么知道你蛋白质的等电点的？

用这么碱性的缓冲液，你的蛋白质会不会失活？有没有做过预备实验？这个条件下，填料是不是比较受考验？快到耐受范围的尽头了吧？

我试过，可以洗脱出来蛋白，能用考马斯亮蓝检测出来，应该就没失活吧，而且能洗脱出来峰。等电点看的文献，我是用碱提酸沉提取的蛋白。我现在就怕长期用这种ph很大的缓冲液对填料有影响，我看说明书ph范围为3-10，在位清洗可到2-11。所以很纠结要不要换ph在它这个范围之内的缓冲液试试

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2022-11-08 19:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
wolfghost: 金币+2, 积极应助奖励~ 2022-11-13 20:49:51
这个填料不太强，我从来不敢用这么碱性的溶液。

用考马斯亮蓝测得出来的蛋白质不一定是没有变性的蛋白质，要看看测定原理。

文献里的蛋白质和你的蛋白质不一定一样，除非氨基酸序列一样。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

rzrzbs
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2022-11-09 21:28:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中科院，化学方向，295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 13/650 2026-03-13 21:15 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:14 by userper
[考研] 26考研求调剂 +5 丶宏Sir 2026-03-13 5/250 2026-03-13 13:05 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 293求调剂，一志愿陕师大生物学 +3 ??????.?.??? 2026-03-09 3/150 2026-03-11 10:02 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 Xinyu Wu311 2026-03-09 4/200 2026-03-09 11:51 by 勇敢太监王公公
[考研] 269求调剂 +3 朔朔话 2026-03-08 4/200 2026-03-08 20:39 by 热情沙漠
[考研] 085701环境工程317分求调剂 +9 6汆尼9 2026-03-07 9/450 2026-03-08 06:41 by 刘兵
[考研] 085701环境工程专业，初试305，均过国家A区线 +7 卡卡来了@ 2026-03-07 8/400 2026-03-08 06:40 by 刘兵
[考研] 0307化学求调剂 +6 0ok0k 2026-03-07 6/300 2026-03-07 20:10 by pies112
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭