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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 双酶切出现问题
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qingbo_

新虫 (初入文坛)

[交流] 双酶切出现问题

求问：酶切，质粒浓度1ug/ul，双酶切体系质粒加了6ul，酶各1ul，5管平行实验，酶切两小时，跑琼脂糖凝胶，加了10xloading buffer，两管颜色呈天蓝色，换一管loading颜色还是那样，跑胶样品直接没出孔，有遇见过这种情况的朋友吗，求解答？
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1楼 2022-09-22 15:47:27
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jinvijie

铁虫 (著名写手)
★
qingbo_(金币+1): 谢谢参与
是DNA的loading buffer吗

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3楼2022-09-23 02:35:05
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shuaibia6

金虫 (小有名气)
★
qingbo_(金币+1): 谢谢参与
多加点loading buffer
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5楼2022-09-23 14:39:50
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qingbo_

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by shuaibia6 at 2022-09-23 14:39:50
多加点loading buffer

谢谢你，有其他同学也出现了加相同量的loading buffer颜色不一样，但是她的跑出来了，儿
而我重复实验之后，五个样中仍然有两个样颜色奇怪，其中一个有目的条带，另一个没有，孔里都保留了天蓝色

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6楼2022-09-24 23:56:03
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qingbo_

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jinvijie at 2022-09-23 02:35:05
是DNA的loading buffer吗

是的，10×，50ul的酶切体系，加了5ul，有个样加了15ul，颜色还是天蓝色不是深蓝色，跑出来条带了，但是位置不对

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7楼2022-09-24 23:58:55
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qingbo_

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by qingbo_ at 2022-09-24 23:56:03
谢谢你，有其他同学也出现了加相同量的loading buffer颜色不一样，但是她的跑出来了，儿
而我重复实验之后，五个样中仍然有两个样颜色奇怪，其中一个有目的条带，另一个没有，孔里都保留了天蓝色
...

重复实验酶切时间缩短为1h

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8楼2022-09-25 00:00:38
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tzynew2楼
2022-09-22 15:49   回复  
qingbo_(金币+1): 谢谢参与
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miaojiabing4楼
2022-09-23 08:17   回复  
qingbo_(金币+1): 谢谢参与
假大空9楼
2022-09-25 10:47   回复  
qingbo_(金币+1): 谢谢参与
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