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求助,sgRNA引物设计时,为什么BsaI的酶切位点为GGCA和AAAC? 已有2人参与
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求助,bsai的酶切位点为 5’.....ggtctc(n)1.....3‘ 3’.....ccagag(n)5......5‘ 为什么在设计sgrna时,正向引物的5’端加入的碱基是ggca,反向引物的5’端加入的是aaac? |
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
一粒种子: 金币+10, 原来是与载体的结构序列有关,非常感谢您! 2022-07-19 15:39:15
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一粒种子: 金币+10, 原来是与载体的结构序列有关,非常感谢您! 2022-07-19 15:39:15
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BsaI酶的识别位点,和剪切位点是不同的。 5’.....ggtctc(n)1.....3‘ 3’.....ccagag(n)5......5‘ ggtctc是识别位点,然后+1后才会切,后面的序列可以随便是什么。而当时这个载体的发明人,就恰好设计成ggca。 另一端为什么是AAAC呢?一位还有第二个BsaI酶的位点,载体的发明人第二个切的地方设计成AAAC。 你仔细把序列看一下,就会明白 |

2楼2022-07-16 13:46:52
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3楼2022-07-16 18:55:34
4楼2022-07-19 15:40:01










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