24小时热门版块排行榜    

查看: 1460  |  回复: 10
【悬赏金币】回答本帖问题,作者Earlyli将赠送您 5 个金币

Earlyli

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因克隆测序结果不是目标基因 已有1人参与

最近在扩增植原体的多个基因,PCR能得到目标条带,但是测序结果总是比对到别的菌,大部分都是枯草芽孢杆菌,单菌落检测也是目标条带,酶用的taq酶,试着换过模板了,还是不行,目前用的模板都是经过16S rRNA基因检测是植原体的,但是其他基因就是克隆不出来,大半年了,快奔溃了,希望有人能给我指点指点,谢谢各位了
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuaibia6

金虫 (小有名气)

做克隆还有人用taq酶吗?
2楼2022-01-17 11:24:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙翔桥

新虫 (小有名气)

你的目的基因在genkank中有吗?可以直接下载下来,进行本地双序列比对的。

发自小木虫Android客户端
3楼2022-01-17 11:36:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙翔桥

新虫 (小有名气)

个人感觉哈,枯草芽孢杆菌的相关序列应该比你的序列在数据库中多很多的。。。

发自小木虫Android客户端
4楼2022-01-17 11:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snhajn

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shuaibia6 at 2022-01-17 11:24:18
做克隆还有人用taq酶吗?

不然用啥

发自小木虫Android客户端
5楼2022-01-17 12:25:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙翔桥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by snhajn at 2022-01-17 12:25:54
不然用啥
...

我们公司提供高保真kod酶,错配率远低于taq,速度2000bp每分钟。可提供免费2*试用装。

发自小木虫Android客户端
6楼2022-01-17 13:24:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙翔桥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by snhajn at 2022-01-17 12:25:54
不然用啥
...

克隆常用pfu和kod。一般认为taq错配率高于前面两个,实验室常用来做菌落菌液鉴定,一般不用来克隆基因。

发自小木虫Android客户端
7楼2022-01-17 13:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengxueren

新虫 (正式写手)

8楼2022-01-17 14:08:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你先Blast一下你的引物吧,估计枯草芽孢杆菌可以匹配,那这个结果也就是不奇怪了
引物特异性的问题
9楼2022-01-18 10:22:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Earlyli

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shuaibia6 at 2022-01-17 11:24:18
做克隆还有人用taq酶吗?

请问您平时都用什么酶
10楼2022-02-16 10:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Earlyli 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 情人节自我反思:在爱情中有过遗憾吗? +5 瞬息宇宙 2026-02-15 6/300 2026-02-18 12:51 by 月下雪林
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错,点赞! +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题,请指教! 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
请填处理意见