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Earlyli

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因克隆测序结果不是目标基因 已有1人参与

最近在扩增植原体的多个基因,PCR能得到目标条带,但是测序结果总是比对到别的菌,大部分都是枯草芽孢杆菌,单菌落检测也是目标条带,酶用的taq酶,试着换过模板了,还是不行,目前用的模板都是经过16S rRNA基因检测是植原体的,但是其他基因就是克隆不出来,大半年了,快奔溃了,希望有人能给我指点指点,谢谢各位了
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龙翔桥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by snhajn at 2022-01-17 12:25:54
不然用啥
...

克隆常用pfu和kod。一般认为taq错配率高于前面两个,实验室常用来做菌落菌液鉴定,一般不用来克隆基因。

发自小木虫Android客户端
7楼2022-01-17 13:26:58
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查看全部 11 个回答

shuaibia6

金虫 (小有名气)

做克隆还有人用taq酶吗?
2楼2022-01-17 11:24:18
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龙翔桥

新虫 (小有名气)

你的目的基因在genkank中有吗?可以直接下载下来,进行本地双序列比对的。

发自小木虫Android客户端
3楼2022-01-17 11:36:57
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龙翔桥

新虫 (小有名气)

个人感觉哈,枯草芽孢杆菌的相关序列应该比你的序列在数据库中多很多的。。。

发自小木虫Android客户端
4楼2022-01-17 11:37:56
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