| 查看: 6403 | 回复: 19 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 pyyfm 的 6 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会 | |||
[交流]
黄嘌呤氧化酶抑制实验-体外降高尿酸实验
|
|||
|
我做了一个体外降高尿酸实验，用了2种实验方法： 1.XOD 抑制活性测试 反应体系体积为 200 μL，依次向 96 孔板中加入样品 40 μL， 20 U/L 的 XOD 溶液 80 μL，在恒温培养箱内 40℃ 孵育 30 min，之后加入 500 μmol/L 底物黄嘌 呤溶液 80 μL，放入 40℃ 恒温培养箱中孵育 15 min，然后在 292 nm 处记录吸光 度值。实验分别设置有样品组（含样品、酶及底物）、空白组（含底物和样品， 不含酶）、阳性对照组（含别嘌呤醇、酶及底物）、酶组（含酶和底物，不加样品）， 各个组均含 3 个复孔，实验重复三次，各样品终浓度为 100 μg/ m L，XOD 抑制 率计算公式为：抑制率（%）=[1-（样品 OD 值-空白 OD 值）/（酶 OD 值-空白 OD 值）]×100%。 这个方法获得实验数据抑制率（%）大于100%。样品与阳性药物的抑制率在高浓度下大于100% 2 NBT法 空白组XOD活性的测定:吸取50mmol·L－1磷酸缓冲液3mL加入至10mL容量瓶中，加入3mL黄嘌呤溶液(2.0mmol·L－1)和0.4mL氯化硝基四氮唑蓝(NBT，1.8mg·L－1)，摇匀，即得XOD活性测定空白溶液。向该空白溶液中加入2.5mL黄嘌呤氧化酶溶液(0.08U·mL－1)，摇匀，得到XOD活性测定溶液，以酶加入时间开始计时，于25℃反应30min后采用752型紫外光栅分光光度计测其560nm下的吸光度值(A0)。样品对XOD抑制活性测定:精密吸取阳性对照药别嘌呤醇(allopurinol)、样品溶液0.5mL，分别置于10mL容量瓶中，按空白组的操作分别加入缓冲液、黄嘌呤溶液和NBT，以酶加入时间开始计时，相同反应条件下，测得各样品的吸光度值(Ax)，根据公式:抑制率(%)=(A0－Ax)/A0×100%计算各化合物对XOD的抑制率。 这种方法存在的问题：不同浓度样品与阳性对照的抑制率不存在梯度，而且抑制率很接近。且阳性药物（别嘌呤醇）在12.5μM的浓度下抑制率只有20%。2种都是相同样品进行测试，得到的抑制率也都不一样。 想请教群里朋友们在做体外XOD 抑制活性测试的时候是否有遇到我一样的情况？ |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿武理材料工程348求调剂
已经有7人回复
-
306求调剂
已经有6人回复
-
一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂
已经有3人回复
-
求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过
已经有9人回复
-
289材料与化工（085600）B区求调剂
已经有4人回复
-
08工科 320总分 求调剂
已经有11人回复
-
一志愿华中农业071010，总分320求调剂
已经有6人回复
-
323求调剂
已经有5人回复
-
284求调剂
已经有5人回复
-
317求调剂
已经有16人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
持续创业者，A8离异男征婚，事业遇到瓶颈，寻找创业生活伴侣
+1/461
-
香港中文大学（深圳）靳羽华教授交叉实验室高薪诚聘博士后（光致变色方向）
+2/144
-
中飞院航空锂电池团队接受硕士生调剂
+1/90
-
“双一流”高校化工类博士“申请-考核”招生 江苏南京
+5/85
-
愿遇见你，遇见不止擦肩而过的缘分
+1/74
-
欢迎交流咨询
+1/42
-
中国科学院杭州医学研究所覃江江课题组招聘博士后
+1/30
-
从专科一路到211硕士，到TOP5博士，也想进高校体制
+1/30
-
北京石油化工学院智能防腐涂层课题组招收2026级调剂研究生
+1/27
-
下周见一个合作者，应该问些什么
+1/19
-
双一流湘潭大学化工学院招收化工、能源动力、工程热物理相关研究生调剂
+1/18
-
【2026考研调剂】南方科技大学-深圳理工大学联培 086000 免疫方向(26.9入学)
+1/9
-
多伦多大学 & Synetic Labs 招博士后/研究员
+1/8
-
【博士招生】武汉科技大学招收材料、化工、环境、冶金类2026年“申请-考核”制博士生
+1/6
-
湖北大学材料学招26级硕士研究生若干名
+1/6
-
【第三轮招生】澳科大诚招2026年秋季药剂学硕士研究生（3月31日下午18:00截止）
+1/5
-
2026考研的同学，分数不够？想调剂上岸的同学，来看
+1/2
-
深圳大学蔡兴科课题组博士后及研究助理招聘
+1/1
-
MTI 380调剂
+1/1
-
2026年浙江清华长三角研究院智慧能源中心招聘博士后-电气方向
+1/1
7楼2021-10-23 14:58:54
9楼2021-10-23 19:15:32
15楼2022-04-13 16:29:32
16楼2022-07-04 09:37:33
18楼2022-07-12 20:39:13
19楼2024-01-25 14:02:33
20楼2024-12-16 15:02:46
简单回复
2021-10-13 12:45
回复
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
nono20093楼
2021-10-13 21:54
回复
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
2021-10-13 23:04
回复
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
6号枫木塔5楼
2021-10-14 22:47
回复
2021-10-15 10:06
回复
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
bjdxyxy8楼
2021-10-23 18:15
回复
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
bjdxyxy10楼
2021-11-03 21:36
回复
bjdxyxy11楼
2021-11-04 19:53
回复
bjdxyxy12楼
2021-11-23 10:04
回复
bjdxyxy13楼
2021-12-18 13:33
回复
bjdxyxy14楼
2021-12-28 16:32
回复
tzynew17楼
2022-07-04 18:32
回复
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
u 发自小木虫Android客户端
