应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 黄嘌呤氧化酶抑制实验-体外降高尿酸实验
51/1返回列表
查看: 6301  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 pyyfm 的 6 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

pyyfm

木虫 (小有名气)

[交流] 黄嘌呤氧化酶抑制实验-体外降高尿酸实验

我做了一个体外降高尿酸实验，用了2种实验方法：
1.XOD 抑制活性测试
反应体系体积为 200 μL，依次向 96 孔板中加入样品 40 μL，  20 U/L 的  XOD
溶液 80 μL，在恒温培养箱内 40℃ 孵育 30 min，之后加入 500 μmol/L 底物黄嘌
呤溶液 80 μL，放入 40℃ 恒温培养箱中孵育 15 min，然后在 292 nm 处记录吸光
度值。实验分别设置有样品组（含样品、酶及底物）、空白组（含底物和样品，
不含酶）、阳性对照组（含别嘌呤醇、酶及底物）、酶组（含酶和底物，不加样品），
各个组均含 3 个复孔，实验重复三次，各样品终浓度为 100 μg/ m L，XOD 抑制
率计算公式为：抑制率（%）=[1-（样品 OD 值-空白 OD 值）/（酶 OD 值-空白
OD 值）]×100%。
这个方法获得实验数据抑制率（%）大于100%。样品与阳性药物的抑制率在高浓度下大于100%

2 NBT法
空白组XOD活性的测定:吸取50mmol·L－1磷酸缓冲液3mL加入至10mL容量瓶中，加入3mL黄嘌呤溶液(2.0mmol·L－1)和0.4mL氯化硝基四氮唑蓝(NBT，1.8mg·L－1)，摇匀，即得XOD活性测定空白溶液。向该空白溶液中加入2.5mL黄嘌呤氧化酶溶液(0.08U·mL－1)，摇匀，得到XOD活性测定溶液，以酶加入时间开始计时，于25℃反应30min后采用752型紫外光栅分光光度计测其560nm下的吸光度值(A0)。样品对XOD抑制活性测定:精密吸取阳性对照药别嘌呤醇(allopurinol)、样品溶液0.5mL，分别置于10mL容量瓶中，按空白组的操作分别加入缓冲液、黄嘌呤溶液和NBT，以酶加入时间开始计时，相同反应条件下，测得各样品的吸光度值(Ax)，根据公式:抑制率(%)=(A0－Ax)/A0×100%计算各化合物对XOD的抑制率。

这种方法存在的问题：不同浓度样品与阳性对照的抑制率不存在梯度，而且抑制率很接近。且阳性药物（别嘌呤醇）在12.5μM的浓度下抑制率只有20%。2种都是相同样品进行测试，得到的抑制率也都不一样。

想请教群里朋友们在做体外XOD 抑制活性测试的时候是否有遇到我一样的情况？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2021-10-13 11:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangdigua

木虫 (文坛精英)
★
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
加油

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
9楼2021-10-23 19:15:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

zhaocl_jq

铜虫 (初入文坛)
★
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
请教一下楼主，第一种方法XOD溶液用什么溶剂？
赞一下 回复此楼
7楼2021-10-23 14:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
nono20093楼
2021-10-13 21:54   回复  
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
bjdxyxy8楼
2021-10-23 18:15   回复  
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
bjdxyxy10楼
2021-11-03 21:36   回复  
bjdxyxy11楼
2021-11-04 19:53   回复  
bjdxyxy12楼
2021-11-23 10:04   回复  
bjdxyxy13楼
2021-12-18 13:33   回复  
bjdxyxy14楼
2021-12-28 16:32   回复  
6号枫木塔5楼
2021-10-14 22:47   回复  
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫IOS客户端
查看全部 20 个回答
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 7/350 2026-02-28 20:42 by 好好好1233
[考研] 材料类求调剂 +5 wana_kiko 2026-02-28 5/250 2026-02-28 20:27 by lwk2004
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 5/250 2026-02-28 20:11 by iwuli
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考博] 博士推荐 +5 花儿笑? 2026-02-21 6/300 2026-02-28 18:53 by nxgogo
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +7 南迦720 2026-02-28 7/350 2026-02-28 18:28 by leonnulll
[考研] 材料学调剂 +4 提神豆沙包 2026-02-28 4/200 2026-02-28 18:26 by houyaoxu
[教师之家] 版面费该交吗 +15 苹果在哪里 2026-02-22 18/900 2026-02-28 18:20 by mibaomingg
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂；
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +3 弗格个 2026-02-28 5/250 2026-02-28 17:04 by sandychj
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考博] 26申博 +3 想申博！ 2026-02-26 3/150 2026-02-28 16:07 by nxgogo
[考研] 290求调剂 +4 材料专硕调剂； 2026-02-28 5/250 2026-02-28 13:32 by houyaoxu
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[基金申请] 面上可以超过30页吧？ +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭