| 查看: 6300 | 回复: 19 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 pyyfm 的 6 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
黄嘌呤氧化酶抑制实验-体外降高尿酸实验
|
|||
|
我做了一个体外降高尿酸实验，用了2种实验方法： 1.XOD 抑制活性测试 反应体系体积为 200 μL，依次向 96 孔板中加入样品 40 μL， 20 U/L 的 XOD 溶液 80 μL，在恒温培养箱内 40℃ 孵育 30 min，之后加入 500 μmol/L 底物黄嘌 呤溶液 80 μL，放入 40℃ 恒温培养箱中孵育 15 min，然后在 292 nm 处记录吸光 度值。实验分别设置有样品组（含样品、酶及底物）、空白组（含底物和样品， 不含酶）、阳性对照组（含别嘌呤醇、酶及底物）、酶组（含酶和底物，不加样品）， 各个组均含 3 个复孔，实验重复三次，各样品终浓度为 100 μg/ m L，XOD 抑制 率计算公式为：抑制率（%）=[1-（样品 OD 值-空白 OD 值）/（酶 OD 值-空白 OD 值）]×100%。 这个方法获得实验数据抑制率（%）大于100%。样品与阳性药物的抑制率在高浓度下大于100% 2 NBT法 空白组XOD活性的测定:吸取50mmol·L－1磷酸缓冲液3mL加入至10mL容量瓶中，加入3mL黄嘌呤溶液(2.0mmol·L－1)和0.4mL氯化硝基四氮唑蓝(NBT，1.8mg·L－1)，摇匀，即得XOD活性测定空白溶液。向该空白溶液中加入2.5mL黄嘌呤氧化酶溶液(0.08U·mL－1)，摇匀，得到XOD活性测定溶液，以酶加入时间开始计时，于25℃反应30min后采用752型紫外光栅分光光度计测其560nm下的吸光度值(A0)。样品对XOD抑制活性测定:精密吸取阳性对照药别嘌呤醇(allopurinol)、样品溶液0.5mL，分别置于10mL容量瓶中，按空白组的操作分别加入缓冲液、黄嘌呤溶液和NBT，以酶加入时间开始计时，相同反应条件下，测得各样品的吸光度值(Ax)，根据公式:抑制率(%)=(A0－Ax)/A0×100%计算各化合物对XOD的抑制率。 这种方法存在的问题：不同浓度样品与阳性对照的抑制率不存在梯度，而且抑制率很接近。且阳性药物（别嘌呤醇）在12.5μM的浓度下抑制率只有20%。2种都是相同样品进行测试，得到的抑制率也都不一样。 想请教群里朋友们在做体外XOD 抑制活性测试的时候是否有遇到我一样的情况？ |
回复此楼» 猜你喜欢
298求调剂
已经有10人回复
-
284求调剂
已经有3人回复
-
面上模板改不了页边距吧？
已经有5人回复
-
276求调剂
已经有4人回复
-
085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂
已经有9人回复
-
博士推荐
已经有6人回复
-
0856材料求调剂
已经有11人回复
-
311求调剂
已经有7人回复
-
材料学调剂
已经有4人回复
-
高分子化学与物理调剂
已经有5人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
87 年东北人定居苏州（听劝补充）
+1/178
-
87 年东北人定居苏州，诚寻携手余生的你
+1/151
-
坐标广州，征女友
+2/138
-
2026年药物化学博士招生
+1/90
-
长期招收有色金属、稀土、固体氧化物燃料电池等领域硕士和博士研究生
+1/90
-
山东理工大学材料学院泰山学者青年专家招收2026年调剂硕士研究生
+1/76
-
同济大学环境学院 肖倩课题组 硕士招生
+1/39
-
湖南大学材料院陶益杰老师招收2026年秋季入学博士生一名-超材料方向
+1/35
-
硕士招生-海南师范大学孙元元老师招2026级学术型硕士生2名
+1/20
-
陕西科技大学2026年博士研究生招生
+1/14
-
人工智能方向招收调剂生
+2/12
-
北京某研究院结构生物学相关专业申请考核制博士招生（春季）
+1/8
-
邀稿综述，作者排名和工作量分工问题，存在不满和疑问。
+1/6
-
香港城市大学招聘博士后 (有机合成/催化/流动化学)
+1/5
-
中科院深圳先进技术研究院成会明院士/唐永炳杰青团队拟招聘博士后若干名。
+1/4
-
【博士招生】广西大学招收电化学方向审核制博士研究生
+1/4
-
中国石油大学（华东）生物质绿色化学转化和生物基功能高分子团队诚招26级硕士生
+1/4
-
深圳大学何传新课题组诚聘“百人计划”（副）教授、助理教授
+1/4
-
智能电网与AI4Energy｜港科大（广州）博士招生
+1/3
-
中科院合肥物质研究院招聘水系锌电博士后（长期有效）诚聘海内外优秀博士后
+1/2
15楼2022-04-13 16:29:32
7楼2021-10-23 14:58:54
9楼2021-10-23 19:15:32
简单回复
nono20093楼
2021-10-13 21:54
回复
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
bjdxyxy8楼
2021-10-23 18:15
回复
pyyfm(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
bjdxyxy10楼
2021-11-03 21:36
回复
bjdxyxy11楼
2021-11-04 19:53
回复
bjdxyxy12楼
2021-11-23 10:04
回复
bjdxyxy13楼
2021-12-18 13:33
回复
bjdxyxy14楼
2021-12-28 16:32
回复
6号枫木塔5楼
2021-10-14 22:47
回复
