| 查看: 7281 | 回复: 19 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 pyyfm 的 6 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
黄嘌呤氧化酶抑制实验-体外降高尿酸实验
|
|||
|
我做了一个体外降高尿酸实验，用了2种实验方法： 1.XOD 抑制活性测试 反应体系体积为 200 μL，依次向 96 孔板中加入样品 40 μL， 20 U/L 的 XOD 溶液 80 μL，在恒温培养箱内 40℃ 孵育 30 min，之后加入 500 μmol/L 底物黄嘌 呤溶液 80 μL，放入 40℃ 恒温培养箱中孵育 15 min，然后在 292 nm 处记录吸光 度值。实验分别设置有样品组（含样品、酶及底物）、空白组（含底物和样品， 不含酶）、阳性对照组（含别嘌呤醇、酶及底物）、酶组（含酶和底物，不加样品）， 各个组均含 3 个复孔，实验重复三次，各样品终浓度为 100 μg/ m L，XOD 抑制 率计算公式为：抑制率（%）=[1-（样品 OD 值-空白 OD 值）/（酶 OD 值-空白 OD 值）]×100%。 这个方法获得实验数据抑制率（%）大于100%。样品与阳性药物的抑制率在高浓度下大于100% 2 NBT法 空白组XOD活性的测定:吸取50mmol·L－1磷酸缓冲液3mL加入至10mL容量瓶中，加入3mL黄嘌呤溶液(2.0mmol·L－1)和0.4mL氯化硝基四氮唑蓝(NBT，1.8mg·L－1)，摇匀，即得XOD活性测定空白溶液。向该空白溶液中加入2.5mL黄嘌呤氧化酶溶液(0.08U·mL－1)，摇匀，得到XOD活性测定溶液，以酶加入时间开始计时，于25℃反应30min后采用752型紫外光栅分光光度计测其560nm下的吸光度值(A0)。样品对XOD抑制活性测定:精密吸取阳性对照药别嘌呤醇(allopurinol)、样品溶液0.5mL，分别置于10mL容量瓶中，按空白组的操作分别加入缓冲液、黄嘌呤溶液和NBT，以酶加入时间开始计时，相同反应条件下，测得各样品的吸光度值(Ax)，根据公式:抑制率(%)=(A0－Ax)/A0×100%计算各化合物对XOD的抑制率。 这种方法存在的问题：不同浓度样品与阳性对照的抑制率不存在梯度，而且抑制率很接近。且阳性药物（别嘌呤醇）在12.5μM的浓度下抑制率只有20%。2种都是相同样品进行测试，得到的抑制率也都不一样。 想请教群里朋友们在做体外XOD 抑制活性测试的时候是否有遇到我一样的情况？ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
博士求助
+1/990
-
求助DL 5009.1-2014
规程 第1部分：火力发电》
+1/494
-
华南理工大学（985、广州）“氢能源技术课题组”诚招2027年博士生（不限专业）
+1/159
-
【鼓励制药工程、化学、药学、材料学等背景的学生报考】湖北工业大学的研究生
+1/97
-
事业编！低空权威机构——中国民航大学诚聘智能仪器与算法相关高端人才
+1/97
-
事业编！低空权威机构——中国民航大学诚聘智能仪器与算法开发高端人才
+1/94
-
南开大学环境科学与工程学院 环境与人体健康方向 招博士研究生
+1/74
-
燕山大学秦志辉教授招生2027年9月入学博士研究生1-2名（高分子材料和柔性电子方向）
+1/40
-
香港科技大学（广州）科研助理（生物医药领域）招聘启事
+1/22
-
西安：诚征女友
+1/22
-
2026国际能源化学会议将于10月23–25日在南昌召开
+1/10
-
备考中科大802材料的小伙伴看过来！
+1/6
-
华海药业诚聘英才
+1/6
-
清华SIGS水下机器人智能控制方向诚招博士生1名
+1/4
-
西安交通大学高国平老师课题组诚招2027年硕博，第一性原理计算、电催化、电池领域
+1/4
-
清华大学SIGS水下机器人智能控制方向诚招博士生1名
+1/3
-
武汉大学电信学院-梁国镇课题组-诚招硕士博士 - 深紫外光源方向 - 2027年入学
+1/3
-
香港城市大学孙红燕课题组招收有化学生物学背景的研究助理，博士生和博士后
+1/2
-
东南大学招收博士研究生
+1/1
-
西安交通大学高国平老师课题组诚招2027年研究生，第一性原理计算、电催化、电池领域
+1/1
18楼2022-07-12 20:39:13
