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lipishun

金虫 (小有名气)

可能你的目的蛋白表达量低,建议用Ni柱纯化一下,本有有诱导不明显,但能纯化出来的个例。祝你好运。
41楼2009-08-20 18:11:09
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shmilyrodin

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
feitiannongying(金币+4,VIP+0):非常感谢!!! 8-21 07:23
也许有可能表达量很低,你看菌体制的样跑出来的PAGE根本看不出来,你先做个大量诱导,比如500ml菌液,温度和IPTG先随便定一个(建议37°,0.2mM)诱导4-5小时,然后收集菌体沉淀,加入20mMTris-HCL 20-30ml,混匀后冻于负-20°(过夜),第二天解冻后超声裂解菌体,离心后,分别取上清和沉淀制样品跑PAGE,上清和沉淀都没有的话很有可能是没有表达,祝你好运!我是用这种方法知道自己的基因表达的
42楼2009-08-20 20:11:14
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