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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 原核表达及诱导
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lipishun

金虫 (小有名气)
可能你的目的蛋白表达量低，建议用Ni柱纯化一下，本有有诱导不明显，但能纯化出来的个例。祝你好运。
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41楼2009-08-20 18:11:09
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shmilyrodin

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
feitiannongying(金币+4,VIP+0):非常感谢！！！ 8-21 07:23
也许有可能表达量很低，你看菌体制的样跑出来的PAGE根本看不出来，你先做个大量诱导，比如500ml菌液，温度和IPTG先随便定一个（建议37°，0.2mM）诱导4-5小时，然后收集菌体沉淀，加入20mMTris-HCL 20-30ml，混匀后冻于负-20°（过夜），第二天解冻后超声裂解菌体，离心后，分别取上清和沉淀制样品跑PAGE，上清和沉淀都没有的话很有可能是没有表达，祝你好运！我是用这种方法知道自己的基因表达的
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42楼2009-08-20 20:11:14
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