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flower1125

好像挺深奥的,怎么来水区了?
21楼2009-08-13 19:24:45
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浮云。。。

至尊木虫 (文坛精英)

学习了
22楼2009-08-13 19:37:09
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superyuanjia

至尊木虫 (著名写手)

转向基因与蛋白互作吧!最近几年的方向
23楼2009-08-13 21:03:51
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24楼2009-08-13 21:05:26
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bear2002_0

至尊木虫 (文坛精英)


feitiannongying(金币+1,VIP+0):谢谢! 8-13 21:36
不是该方向的,帮顶一下吧
25楼2009-08-13 21:08:53
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userhung

禁虫 (文学泰斗)

木虫博士


feitiannongying(金币+1,VIP+0):恩,我会尝试的.谢谢! 8-13 21:36
引用回帖:
Originally posted by magicsite at 2009-8-13 14:25:
你需要考虑1.是否基因本身具有信号肽,如果有的话需要去掉,原核不能识别它;2.设置诱导梯度20度24小时25度12小时28度8小时30度4小时,再试试看吧!

同意此观点,照着做试一试哦~~~
26楼2009-08-13 21:21:12
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尼亚2168


feitiannongying(金币+1,VIP+0):谢谢! 8-13 21:35
希望lz能得到满意的答案 我对这个不懂 但还是帮助顶贴
27楼2009-08-13 21:23:26
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28楼2009-08-13 21:31:14
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xiaoyur

金虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
feitiannongying(金币+5,VIP+0):谢谢!这个帖子一开始是在生物版里的,最后被移到这里来了 8-13 22:16
feitiannongying(金币+3,VIP+0): 10-11 07:07
引用回帖:
Originally posted by magicsite at 2009-8-13 14:25:
你需要考虑1.是否基因本身具有信号肽,如果有的话需要去掉,原核不能识别它;2.设置诱导梯度20度24小时25度12小时28度8小时30度4小时,再试试看吧!

1, 很可能信号肽影响表达。我曾经表达一个蛋白,用了很多载体和菌株都不行,最后去掉信号肽很容易就表达出来了。你表达的膜蛋白一般应该有信号肽。
2,仔细看看NOVAGEN公司的《原核表达手册》。网上有电子版的。
3,IPTG的添加浓度与原核表达载体的启动子有关,不同的启动子要求的浓度不一样。
4,建议到生物版求助,那里高手多。
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
29楼2009-08-13 22:09:05
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magicsite

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
feitiannongying(金币+5,VIP+0):谢谢!! 8-14 09:40
feitiannongying(金币+2,VIP+0): 10-11 07:08
引用回帖:
Originally posted by xiaoyur at 2009-8-13 22:09:

1, 很可能信号肽影响表达。我曾经表达一个蛋白,用了很多载体和菌株都不行,最后去掉信号肽很容易就表达出来了。你表达的膜蛋白一般应该有信号肽。
2,仔细看看NOVAGEN公司的《原核表达手册》。网上有电子版的 ...

1.是否具有信号肽建议通过结合信号肽预测和亲疏水性分析最终判断;
2.可能你还得考虑跨膜域的影响,膜蛋白可能会具有跨膜域,会影响在原核中的表达
3.的确应该仔细看看NOVAGEN公司的《原核表达手册》。
30楼2009-08-14 08:41:42
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