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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 原核表达及诱导
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flower1125

好像挺深奥的，怎么来水区了？
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21楼2009-08-13 19:24:45
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浮云。。。

至尊木虫 (文坛精英)
学习了
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22楼2009-08-13 19:37:09
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superyuanjia

至尊木虫 (著名写手)
转向基因与蛋白互作吧！最近几年的方向
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23楼2009-08-13 21:03:51
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沧智
24楼2009-08-13 21:05:26
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bear2002_0

至尊木虫 (文坛精英)
★
feitiannongying(金币+1,VIP+0):谢谢！ 8-13 21:36
不是该方向的，帮顶一下吧
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25楼2009-08-13 21:08:53
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userhung

禁虫 (文学泰斗)

木虫博士
★
feitiannongying(金币+1,VIP+0):恩，我会尝试的.谢谢！ 8-13 21:36
引用回帖:
Originally posted by magicsite at 2009-8-13 14:25:
你需要考虑1.是否基因本身具有信号肽，如果有的话需要去掉，原核不能识别它；2.设置诱导梯度20度24小时25度12小时28度8小时30度4小时，再试试看吧！

同意此观点，照着做试一试哦~~~
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26楼2009-08-13 21:21:12
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尼亚2168

★
feitiannongying(金币+1,VIP+0):谢谢！ 8-13 21:35
希望lz能得到满意的答案 我对这个不懂 但还是帮助顶贴
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27楼2009-08-13 21:23:26
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蓝皮鼠7983
28楼2009-08-13 21:31:14
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xiaoyur

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
feitiannongying(金币+5,VIP+0):谢谢！这个帖子一开始是在生物版里的，最后被移到这里来了 8-13 22:16
feitiannongying(金币+3,VIP+0): 10-11 07:07
引用回帖:
Originally posted by magicsite at 2009-8-13 14:25:
你需要考虑1.是否基因本身具有信号肽，如果有的话需要去掉，原核不能识别它；2.设置诱导梯度20度24小时25度12小时28度8小时30度4小时，再试试看吧！

1, 很可能信号肽影响表达。我曾经表达一个蛋白，用了很多载体和菌株都不行，最后去掉信号肽很容易就表达出来了。你表达的膜蛋白一般应该有信号肽。
2，仔细看看NOVAGEN公司的《原核表达手册》。网上有电子版的。
3，IPTG的添加浓度与原核表达载体的启动子有关，不同的启动子要求的浓度不一样。
4，建议到生物版求助，那里高手多。
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爱的反义词不是恨 而是冷漠!
29楼2009-08-13 22:09:05
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magicsite

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
feitiannongying(金币+5,VIP+0):谢谢！！ 8-14 09:40
feitiannongying(金币+2,VIP+0): 10-11 07:08
引用回帖:
Originally posted by xiaoyur at 2009-8-13 22:09:

1, 很可能信号肽影响表达。我曾经表达一个蛋白，用了很多载体和菌株都不行，最后去掉信号肽很容易就表达出来了。你表达的膜蛋白一般应该有信号肽。
2，仔细看看NOVAGEN公司的《原核表达手册》。网上有电子版的 ...

1.是否具有信号肽建议通过结合信号肽预测和亲疏水性分析最终判断；
2.可能你还得考虑跨膜域的影响，膜蛋白可能会具有跨膜域，会影响在原核中的表达
3.的确应该仔细看看NOVAGEN公司的《原核表达手册》。
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30楼2009-08-14 08:41:42
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