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feitiannongying

铁杆木虫 (著名写手)

我这个膜蛋白预测有四个跨膜区域。关于膜蛋白跨膜域影响在原核中的表达有没有相关的文章。恳请推荐几篇,如果有原文的话可否发我邮箱里:feitiannongying@163.com谢谢!!
31楼2009-08-14 09:43:48
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

★ ★
feitiannongying(金币+2,VIP+0):有没有相关的文章谢谢!! 8-14 10:15
膜蛋白一般只表达胞外区,否则即使表达出来复性也很困难
32楼2009-08-14 09:52:09
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paulajjh

木虫 (著名写手)


feitiannongying(金币+1,VIP+0):谢谢!!序列没问题 8-14 11:43
我有个同学做表达,一直表达不出来,测序结果也正确,后来分析,是中间有个终止密码,基因突变后重新表达,表达出来了,你看看你有没类似的情况.
33楼2009-08-14 11:20:24
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银杏下

金虫 (小有名气)


feitiannongying(金币+1,VIP+0):谢谢!! 8-14 16:55
像你这种蛋白,之前肯定有膜定位信号,只是看你构建时有没注意到这个问题然后去除,很明显这会影响蛋白表达。另外一个很重要的可能是密码子偏爱性的问题,你可以尝试用Rosetta(DE3)表达。
34楼2009-08-14 13:50:29
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vivihao

金虫 (小有名气)

马上也要做诱导表达,希望LZ顺利,自己顺利!
35楼2009-08-18 13:25:25
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ytmito1986

金虫 (小有名气)

降低诱导温度可能会好点
36楼2009-08-18 18:09:35
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fromstick

银虫 (正式写手)

大家一起交流,也学习了!
虽然我是个菜鸟,但我依然热爱生物学!
37楼2009-08-18 21:58:38
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VVWW

新虫 (小有名气)

不知道PH是否对其表达产生影响
38楼2009-08-19 12:40:40
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VVWW

新虫 (小有名气)

在我做转基因的时候PH值是个很关键的因素,而且在所有生物的体液系统都很重要
39楼2009-08-19 12:41:36
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zjwang

木虫 (正式写手)

也有可能是表达量太少,电泳检测不出来,有抗体的话用抗体检测一下。
40楼2009-08-20 09:40:53
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