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PCR后电泳条带很浅，换了引物、重新提取了核酸也还是这样 已有2人参与
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| 原本是想做荧光定量PCR，但是有些基因能扩增出来，有些不能，扩增出来的循环数都很高，所以做了普通的PCR测试引物的情况，结果就是条带非常浅。一开始是怀疑引物有问题，就从网上找了引物合成的详细步骤一步一步的做，结果条带还是很浅。所以想是不是模板有问题，因为线虫体壁裂解总是不彻底，所以这次直接提取了RNA，逆转录之后又跑了PCR，跑胶之前测了A260/280和A260/230，分别是1.807和2.331 。跑胶的结果还是非常浅的条带，但是marker是过曝的。不是有拖尾那种浅，看起来很干净，没有拖尾，就在最后有一条很浅的干净的条带。marker用的是DL2000的，产物的大小本来也该在最下面。现在怀疑是引物二聚体。但是换了这么多对引物，如果一直有引物二聚体，那是哪里的问题呢？求助大家，谢谢～ |
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2楼2021-05-15 14:22:20
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