| 查看: 2211 | 回复: 3 | ||
饿的神啊新虫 (著名写手)
|
[求助]
真菌基因组DNA电泳无条带，急求帮助 已有2人参与
|
半个月前用ctab法提取了镰刀菌的dna，用nanodrop检测了浓度，基本在1000ng/ul，260/230在1.8-2.0之间，当时认为质量不错，没有电泳检测，将dna稀释后做了pcr模板，扩增结果也很好。 直到这两天打算做southern blot，预酶切用了3种酶，dna模板量用了2ug，酶切过夜后电泳无结果。次日将dna模板加到了10-20ug，酶切后浓缩酶切产物，电泳也无结果。 1、2、3为10ugdna模板对应3种酶的酶切产物；4为10ug dna（未酶切）；5、6、7为20ugdna模板对应3种酶的酶切产物  我一度怀疑是用的酶不对，直到我把没有稀释的dna（未酶切）一起电泳，结果电泳结果只有100bp的位置有一团，我才意识到我的dna模板有问题。1、3为同一模板，浓度为550ng/ul，上样量分别为5ul和1ul；2、4为同一模板，浓度为1200ng/ul，上样量分别为5ul和1ul。  怎么这么邪门呀，稀释30多倍pcr扩增都很好，怎么电泳一点都没有呢？急求帮助！@biostar2009@wizardfan |
回复此楼» 猜你喜欢
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有66人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
-
伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预
已经有1人回复
-
西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路
已经有0人回复
-
金色抗生素单硫酸卡那霉素的物化性质、制备与前景
已经有0人回复
-
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
2楼2021-04-22 20:28:41
饿的神啊
新虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 5982.7
- 散金: 122
- 帖子: 1004
- 在线: 66.3小时
- 虫号: 2477988
- 注册: 2013-05-23
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
3楼2021-04-22 22:26:58
rhapsody007
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 1001.8
- 散金: 121
- 红花: 2
- 帖子: 76
- 在线: 48.3小时
- 虫号: 2465037
- 注册: 2013-05-15
- 性别: GG
- 专业: 基因组学
4楼2021-04-23 14:51:06