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饿的神啊新虫 (著名写手)
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真菌基因组DNA电泳无条带，急求帮助 已有2人参与
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半个月前用ctab法提取了镰刀菌的dna，用nanodrop检测了浓度，基本在1000ng/ul，260/230在1.8-2.0之间，当时认为质量不错，没有电泳检测，将dna稀释后做了pcr模板，扩增结果也很好。 直到这两天打算做southern blot，预酶切用了3种酶，dna模板量用了2ug，酶切过夜后电泳无结果。次日将dna模板加到了10-20ug，酶切后浓缩酶切产物，电泳也无结果。 1、2、3为10ugdna模板对应3种酶的酶切产物；4为10ug dna（未酶切）；5、6、7为20ugdna模板对应3种酶的酶切产物  我一度怀疑是用的酶不对，直到我把没有稀释的dna（未酶切）一起电泳，结果电泳结果只有100bp的位置有一团，我才意识到我的dna模板有问题。1、3为同一模板，浓度为550ng/ul，上样量分别为5ul和1ul；2、4为同一模板，浓度为1200ng/ul，上样量分别为5ul和1ul。  怎么这么邪门呀，稀释30多倍pcr扩增都很好，怎么电泳一点都没有呢？急求帮助！@biostar2009@wizardfan |
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4楼2021-04-23 14:51:06
