应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 真菌基因组DNA电泳无条带，急求帮助
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
41/1返回列表
查看: 2146  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 真菌基因组DNA电泳无条带，急求帮助 已有2人参与

半个月前用ctab法提取了镰刀菌的dna，用nanodrop检测了浓度，基本在1000ng/ul，260/230在1.8-2.0之间，当时认为质量不错，没有电泳检测，将dna稀释后做了pcr模板，扩增结果也很好。
真菌基因组DNA电泳无条带，急求帮助
      直到这两天打算做southern blot，预酶切用了3种酶，dna模板量用了2ug，酶切过夜后电泳无结果。次日将dna模板加到了10-20ug，酶切后浓缩酶切产物，电泳也无结果。
1、2、3为10ugdna模板对应3种酶的酶切产物；4为10ug dna（未酶切）；5、6、7为20ugdna模板对应3种酶的酶切产物
真菌基因组DNA电泳无条带，急求帮助-1
       我一度怀疑是用的酶不对，直到我把没有稀释的dna（未酶切）一起电泳，结果电泳结果只有100bp的位置有一团，我才意识到我的dna模板有问题。1、3为同一模板，浓度为550ng/ul，上样量分别为5ul和1ul；2、4为同一模板，浓度为1200ng/ul，上样量分别为5ul和1ul。
真菌基因组DNA电泳无条带，急求帮助-2
       怎么这么邪门呀，稀释30多倍pcr扩增都很好，怎么电泳一点都没有呢？急求帮助！@biostar2009@wizardfan
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-04-21 18:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

屎胖纸

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这个dna电泳，明显没有提出来呀，做southern肯定是要先电泳看条带亮度，单一无杂带。你pcr那个是不准的吧，pcr有时候只需要有一点点片段，都能扩出来。
赞一下 回复此楼
2楼2021-04-22 20:28:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

饿的神啊

新虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 屎胖纸 at 2021-04-22 20:28:41
你这个dna电泳，明显没有提出来呀，做southern肯定是要先电泳看条带亮度，单一无杂带。你pcr那个是不准的吧，pcr有时候只需要有一点点片段，都能扩出来。

可是nanodrop测浓度很好，比值也很好，怎么电泳会一点条带都没有呢，以前从没有遇到这个情况。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2021-04-22 22:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rhapsody007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
饿的神啊: 金币+100, ★有帮助 2021-05-25 16:07:03
nanodrop好≠电泳好，电泳不好≠nanodrop不好，这两个应该用来互相印证。
“半个月前用ctab法提取了镰刀菌的dna”，是不是把DNA放-20了，冻融影响了？
赞一下 回复此楼
吉恩特磁珠
4楼2021-04-23 14:51:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 饿的神啊 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +5 辰沐5211314 2026-03-26 5/250 2026-03-28 01:48 by 飞行日记西
[考研] 0856，材料与化工321分求调剂 +7 大馋小子 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:31 by 无际的草原
[考研] 320分，材料与化工专业，求调剂 +5 一定上岸aaa 2026-03-27 7/350 2026-03-27 22:21 by 一定上岸aaa
[考研] 322求调剂 +4 宋明欣 2026-03-27 4/200 2026-03-27 22:02 by 催化大白
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 求调剂 +5 芦lty 2026-03-25 6/300 2026-03-26 20:49 by 不吃魚的貓
[考研] 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-03-21 4/200 2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 6/300 2026-03-26 18:03 by 邱gl
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 考研调剂 +6 来好运来来来 2026-03-21 7/350 2026-03-25 22:43 by 418490947
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭