应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 线性化酶的选择
51/1返回列表
查看: 2474  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

西瓜包123

铜虫 (正式写手)
已领完
线性化酶的选择
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫，下载小木虫客户端

请问有人做过用pPIC9K表达载体来做GS115酵母表达外源基因实验吗？线性化质粒酶切的是sacⅠ位点还是salⅠ位点，有何区别？线性化之后的纯化原理？怎么纯化？

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-03-29 15:19:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)
这布建议大提质粒，达到所需浓度。然后线性化后可以乙醇沉淀浓缩一下，效果很好

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
16楼2022-08-07 03:30:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
两个都可以。插入位点有差异。关系不大。线性化后不要纯化。因为电转化要比较高的DNA浓度，纯化都会造成大量损失。所以最好在线性化之前把质粒浓度提高到转化所需浓度(大于1ug/ul,略低关系不太大)，然后再线性化，线性化后直接电转。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

西瓜包123
12楼2021-03-30 08:36:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜包123

铜虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-03-30 08:36:56
两个都可以。插入位点有差异。关系不大。线性化后不要纯化。因为电转化要比较高的DNA浓度，纯化都会造成大量损失。所以最好在线性化之前把质粒浓度提高到转化所需浓度(大于1ug/ul,略低关系不太大)，然后再线性化，线 ...

谢谢你！

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
13楼2021-04-02 22:55:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fbcjm

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-03-30 08:36:56
两个都可以。插入位点有差异。关系不大。线性化后不要纯化。因为电转化要比较高的DNA浓度，纯化都会造成大量损失。所以最好在线性化之前把质粒浓度提高到转化所需浓度(大于1ug/ul,略低关系不太大)，然后再线性化，线 ...

线性化后不需要别的步骤了吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
14楼2022-07-11 14:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
snoopyzxx11楼
2021-03-30 08:33   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
tzynew2楼
2021-03-29 15:20   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
飞翔之翼989楼
2021-03-30 02:37   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
bdfh10楼
2021-03-30 03:40   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
plantabiotic6楼
2021-03-29 16:04   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
gao199207074楼
2021-03-29 15:41   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
秋土豆香7楼
2021-03-29 16:05   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
风度尽量翩8楼
2021-03-29 16:35   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
lalavie3楼
2021-03-29 15:37   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
彳亍不是5楼
2021-03-29 16:02   回复  
西瓜包123(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-10-01 21:59 by Equinoxhua
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-10-01 21:07 by Equinoxhua
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:52 by Z9YWQ5EAO3qp
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:45 by Z9YWQ5EAO3qp
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 6/300 2026-09-30 16:14 by Z9YWQ5EAO3qp
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 13:35 by C3vABopYbZJS
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭