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线性化酶的选择
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西瓜包123
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请问有人做过用pPIC9K表达载体来做GS115酵母表达外源基因实验吗?线性化质粒酶切的是sacⅠ位点还是salⅠ位点,有何区别?线性化之后的纯化原理?怎么纯化?
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2021-03-29 15:19:15
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snoopyzxx
at 2021-03-30 08:36:56
两个都可以。插入位点有差异。关系不大。线性化后不要纯化。因为电转化要比较高的DNA浓度,纯化都会造成大量损失。所以最好在线性化之前把质粒浓度提高到转化所需浓度(大于1ug/ul,略低关系不太大),然后再线性化,线 ...
线性化后不需要别的步骤了吗?
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14楼
2022-07-11 14:18:16
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
两个都可以。插入位点有差异。关系不大。线性化后不要纯化。因为电转化要比较高的DNA浓度,纯化都会造成大量损失。所以最好在线性化之前把质粒浓度提高到转化所需浓度(大于1ug/ul,略低关系不太大),然后再线性化,线性化后直接电转。
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西瓜包123
12楼
2021-03-30 08:36:56
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12楼
:
Originally posted by
snoopyzxx
at 2021-03-30 08:36:56
两个都可以。插入位点有差异。关系不大。线性化后不要纯化。因为电转化要比较高的DNA浓度,纯化都会造成大量损失。所以最好在线性化之前把质粒浓度提高到转化所需浓度(大于1ug/ul,略低关系不太大),然后再线性化,线 ...
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13楼
2021-04-02 22:55:11
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snoopyzxx
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飞翔之翼98
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bdfh
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gao19920707
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秋土豆香
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风度尽量翩
8楼
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lalavie
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2021-03-29 15:37
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彳亍不是
5楼
2021-03-29 16:02
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